流式细胞仪的使用程序
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一.开机程序
1 .检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。
2 .打开储液箱,倒掉废液,并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS或FACSFlow),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。
3 .将FACSCalibur开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY,预热5-10分钟。排出过滤器内的气泡。
4 .如果需要打印,打开打印机电源。
5 .打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。
6 .执行仪器PRIME功能一次,以排除Flowcell中的气泡。
7 .分析样品时,先用FACAFlow或PBS进行HIGHRUN约2分钟。
X.做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个50ml离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。
二.预设获取模式文件(AcquisitionTemplateFiles)
1 .从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
2 .选取屏幕左列绘图工具中的Dotplot,绘出一个或多个DotPlots(点图)。从DotPlot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源,并确定适当的x轴和y轴参数。
3 .选取屏幕左列绘图工具中的Histogram,同上法可绘出Histogram(直方图)。
4 .将此视窗命名后储存于FACStationG3\BDApplications\CELLQuestFolder\EXP文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。
X.本计算机中已设定两个模式文件:ACQ和EXP,储存于FACStationG3\BDApplications\CELLQuest\EXP文件夹中,ACQ用于细胞DNA检测,EXP用于细胞表面标志分析。