流式细胞仪的使用程序

一、开机程序

1、检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。

2、打开储液箱，倒掉废液，并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。

3、将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5～10分钟。排出过滤器内的气泡。

4、如果需要打印，打开打印机电源。

5、打开电脑，等待屏幕显示出标准的苹果标志。

6、执行仪器PRIME功能一次，以排除Flow cell中的气泡。

7、分析样品时，先用FACAFlow 或PBS进行HIGH RUN约2分钟。

做过分选后，每次开机后需冲洗管道：向分选装置上装上两个50ml离心管，不接通浓缩系统，摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置，同上法冲洗一次。

二、预设获取模式文件（Acquisition Template Files）

1、从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗，可利用此视窗编辑一个获取模式文件。

2、选取屏幕左列绘图工具中的Dot plot，绘出一个或多个Dot Plots。从Dot Plot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源，并确定适当的x轴和y轴参数。

3、选取屏幕左列绘图工具中的Histogram，同上法可绘出Histogram。

4、将此视窗命名后储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest Folder \EXP文件夹中，下次进行相同实验时可直接调用。

本计算机中已设定两个模式文件：ACQ和EXP，储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest \EXP文件夹中，ACQ用于细胞DNA检测，EXP用于细胞表面标志分析。

三、用CELLQuest进行仪器的设定和调整

1、从苹果画面中选取CELLQuest，进入CELLQuest后在File指令栏中打开合适的获取模式文件。

2、从屏幕上方Acquire指令栏中，选取Connect to Cytometer（快捷键：+B）进行电脑和仪器的连机。将出现的Acquisiton Control对话框移至合适位置。