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流式细胞仪的使用程序

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1849

一、开机程序

1.检查稳压器电源,打开电源,稳定 5 分钟。

2.打开储液箱,倒掉废液 , 并在废液桶中加入 400ml 漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至 4/5 满(一般可用三蒸水,做分选必须用 PBS 或 FACSFlow ),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。

3.将 FACSCalibur 开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是 STANDBY ,预热 5 - 10 分钟。排出过滤器内的气泡。

4.如果需要打印,打开打印机电源。

5.打开电脑 , 等待屏幕显示出标准的苹果标志。

6.执行仪器 PRIME 功能一次,以排除 Flow cell 中的气泡。

7.分析样品时,先用 FACAFlow 或 PBS 进行 HIGH RUN 约 2 分钟。

8.做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个 50ml 离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。

二. 预设获取模式文件 (Acquisition Template Files)

1. 从苹果标志中选择 CELLQuest 见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个获取模式文件。

2. 选取屏幕左列绘图工具中的 Dot plot ,绘出一个或多个 Dot Plots 。从 Dot Plot 对话框中选取 Acquisition 作为图形资料来源,并确定适当的 x 轴和 y 轴参数。

3. 选取屏幕左列绘图工具中的 Histogram ,同上法可绘出 Histogram (直方图)。

4. 将此视窗命名后储存于 FACStation G3\BD Applications \CELLQuest Folder \EXP 文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。

5. 本计算机中已设定两个模式文件: ACQ 和 EXP ,储存于 FACStation G3\BD Applications \CELLQuest \EXP 文件夹中, ACQ 用于细胞 DNA 检测, EXP 用于细胞表面标志分析。

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