【旧帖整理】miRNA、siRNA、RNA干扰原理，步骤及相关问题总结！有问题的也可以提，共同交流讨论！

RNA干扰（RNAi）：近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。

MicroRNA（miRNA,微RNA）：即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族。

小的干涉RNA（siRNA）：是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA，由约20个碱基对组成，包括5个磷酸盐，2个核苷和3个悬臂。

miRNA与siRNA之间有许多相同之处：1.二者的长度都约在22nt左右。2.二者都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC组分，所以其功能界限变得不清晰，如二者在介导沉默机制上有重叠。5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的。

miRNA与siRNA的不同点：1.根本区别是miRNA是内源的，是生物体的固有因素；而siRNA是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物。2.结构上，miRNA是单链RNA，而siRNA是双链RNA。3.Dicer酶对二者的加工过程不同，miRNA是不对称加工，miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂，其他部分降解；而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。5.在作用方式上，miRNA可抑制靶标基因的翻译，也可以导致靶标基因降解，即在转录水平后和翻译水平起作用，而siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。6.miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达，而siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。

miRNA分离\纯化\测序
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1629780_1.html

miRNA和RNA干扰相关资料
http://www.dxy.cn/bbs/thread/8089146

miRNA功能分析
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5471896&sty=1&tpg=2&age=0

miRNA PPT（我下载了一下很不错）
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2839113_1.html

miRNA的加工
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2695751_1.html

miRNA作用机理图
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6989211_1.html
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3276097_1.html （实验方法）

miRNA切较回收
http://www.dxy.cn/bbs/thread/8902150

siRNA和miRNA区别
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2498685_1.html
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3072624_1.html

小分子量的RNA怎么证明就是miRNA?
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4492817_1.html

miRNA的RT-PCR
http://www.dxy.cn/bbs/thread/6902242

miRNA和siRNA的PDF文献
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1761357_1.html

两个miRNA的序列数据库
http://www.dxy.cn/bbs/thread/6928315

MicroRNA Protocols
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6682221_1.html

RNA干扰技术
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3257321_1.html

MicroRNA重要文献
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1614044_1.html

小RNA，siRNA，miRNA研究进展
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1884503&sty=3&keywords=miRNA

siRNA转染操作讨论
http://www.dxy.cn/bbs/thread/9093901
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3087857_1.html
http://www.dxy.cn/bbs/thread/7649157
http://www.dxy.cn/bbs/thread/8412114

siRNA转染阴性对照
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=7151795&sty=1&tpg=1&age=0

magiclyj 战友整理的关于siRNA资料

http://www.dxy.cn/bbs/thread/1013883

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