【求助】急！慢病毒包装
丁香园论坛
2039
大家好，我现在正在做慢病毒包装，用的是CLONTECK的包装系统，第一次感染293T细胞后，荧光很亮，48H后收集病毒上清，离心后冻于-80度，一天后感染靶细胞，什么都没有？请问大家是怎末做的？谢谢。
看到荧光并不代表包装成功,它代表的只是你的质粒转进去了。做慢病毒包装时必须要搭配好几个质粒的比例。转染之后要能看到细胞形态的病变。收集上清的时候要注意尽快分装保存。有可能的话最好把细胞也裂解一下，也许你的病毒没释放出来呢
感染需要时间的，而且慢病毒一般需要多次感染的。它会整合到染色体。
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是不是楼主的病毒还没张好，收病毒的时间早了呢，可以在48h收了后，继续加培养基，72h再收一次，此外，考虑可能是楼主的细胞状态是不是不够好或者病毒的各个质粒的比例没有协调好。
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