【求助】怎样设计实验验证:P53经翻译后修饰,不再与靶基因结合
丁香园论坛
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做的病毒。被指定了一个新方向,假设X病毒可以诱导P53的翻译后修饰,使其不再与靶基因结合。应该设计哪些实验来验证呀? (病毒诱导的P53翻译后修饰种类可能为磷酸化或者乙酰化,不确定。)
完全没有信号传导方面的经验,还请多多指教。希望可以简短的把所需要做的实验罗列一下,怕自己是新手,考虑不周全。谢谢!
完全没有信号传导方面的经验,还请多多指教。希望可以简短的把所需要做的实验罗列一下,怕自己是新手,考虑不周全。谢谢!
1、X病毒诱导后,用磷酸化或者乙酰化抗体检测P53的变化。
2、X病毒诱导后检测P53-Luciferase的荧光值变化。
3、X病毒诱导后检测电泳迁移率实验(EMSA),或者检测已知靶基因表达量的变化。
4、X病毒诱导后检测能使P53磷酸化或者乙酰化的酶的变化。
5、更高级点点,把相应的酶干扰掉,看看病毒诱导只有p53还能不能发生相应变化。
6、再高级点,找找相应信号通路
2、X病毒诱导后检测P53-Luciferase的荧光值变化。
3、X病毒诱导后检测电泳迁移率实验(EMSA),或者检测已知靶基因表达量的变化。
4、X病毒诱导后检测能使P53磷酸化或者乙酰化的酶的变化。
5、更高级点点,把相应的酶干扰掉,看看病毒诱导只有p53还能不能发生相应变化。
6、再高级点,找找相应信号通路
xiaozhangwei2 wrote:
做的病毒。被指定了一个新方向,假设X病毒可以诱导P53的翻译后修饰,使其不再与靶基因结合。应该设计哪些实验来验证呀? (病毒诱导的P53翻译后修饰种类可能为磷酸化或者乙酰化,不确定。)
完全没有信号传导方面的经验,还请多多指教。希望可以简短的把所需要做的实验罗列一下,怕自己是新手,考虑不周全。谢谢!
只是因为p53出名吗?
还是有什么直接或者间接的证据呢
不知道是哪一个人指定你这样没头绪的设计
是有了证据,才这样设计的。shylook同学好愤青呀,请平静下哦。。。
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