如何验证蛋白和糖结合

dxy_lywi9f05

2023-05-26

目前在真菌中表达了一个蛋白，该蛋白可以识别结合葡聚糖，请问如何验证这个蛋白结合上了葡聚糖么？有具体的实验方法么？请求大神指导一下～～

毛利小五郎的徒弟

2023-05-27

有帮助

可以检测蛋白与葡聚糖的连接键也就是糖肽键来检测蛋白和葡聚糖的结合。

方法有几种，但是对蛋白的需求量不同。

1、亲和色谱法：蛋白溶液跑亲和层析柱子，buffer洗，收集结合特异性强的部分，进行检测。

2、电泳检测：将蛋白、蛋白和多糖的共孵育液跑电泳，比较条带的位置。

3、HPLC Size Exclusion：蛋白和多糖的共孵育液跑HPLC Size Exclusion。

4、如果蛋白量少，可以用生物大分子相互作用仪（Biacore）