【求助】Feulgen染色法的具体解释是什么?
丁香园论坛
1984
大家好,最近遇到一个很是头疼的问题。Feulgen染色法是什么东东?在网上搜了很多资料,但是解释都不是很好。今天突发奇想,到我们丁香园来求助,希望能够得到满意的答案。
这是我在资源网站上http://goo.gl/9WJmO看到的,上传人是徐若雨,找了半天才解决你这个问题。
Feulgen染色法:
1924年建立,对DNA进行特异性染色
基本原理:细胞中的DNA在60℃时用1mol/L HCI会解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷键被破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖中的醛基游离,醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。
RNA对酸比较稳定,醛基难游离,不被着色,因此染色后,细胞核成粉红色至紫红色,细胞质为无色。
冷冻保护剂:可以保护细胞免受冷冻损伤的对细胞无明显毒性的物质。
渗透性冷冻保护剂:甘油、二甲亚砜(DMSO)、乙二醇、乙酰胺和甲醇等。
渗透性保护剂易于水分子结合,易穿透细胞膜进入细胞内部,从而可以降低细胞的冰点,提高细胞质膜对水的通透性。冻存时,保护剂可促进细胞内水分渗出细胞外,从而减少胞内冰晶的形成;复苏时,促进胞外水分进入细胞,缓解渗透性肿胀引起的损伤。
细胞最易受损的温度:-5-0℃
细胞培养(cell culture):从体内组织分离细胞,模拟体内环境,在无菌、适当条件下使其生长繁殖的一种技术。
悬浮培养固定化培养..原代培养传代培养..分批培养流加培养半连续培养连续培养.灌流培养等
细胞培养可以有分批式、流加式、半连续式、连续式和灌流式5种操作方式。
细胞生长:5个阶段——延迟期、指数生长期、减速期、平台期和衰退期。
分批式培养的特点
⑴操作简单,培养周期短。
培养系统属于封闭式,培养过程中与外部环境没有物料交换,染菌和细胞变异概率低。除了控制温度、pH和通气量或搅拌速度外,不进行其他任何控制。
⑵直观反映细胞生长代谢过程。
一个相对固定的环境中,适合研究营养消耗、细胞生长、代谢产物积累规律。
⑶可直接放大。规模放大比较容易。
分批式培养的缺点
不能控制底物浓度、细胞易老化、生长周期短、效率低等。
反馈阻遏属于转录水平的酶量调节,产生效应慢,往往会影响催化一系列反应的多个酶;
反馈抑制是酶活性水平调节,产生效应快,一般仅对某一种酶起作用。
Feulgen染色法:
1924年建立,对DNA进行特异性染色
基本原理:细胞中的DNA在60℃时用1mol/L HCI会解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷键被破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖中的醛基游离,醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。
RNA对酸比较稳定,醛基难游离,不被着色,因此染色后,细胞核成粉红色至紫红色,细胞质为无色。
冷冻保护剂:可以保护细胞免受冷冻损伤的对细胞无明显毒性的物质。
渗透性冷冻保护剂:甘油、二甲亚砜(DMSO)、乙二醇、乙酰胺和甲醇等。
渗透性保护剂易于水分子结合,易穿透细胞膜进入细胞内部,从而可以降低细胞的冰点,提高细胞质膜对水的通透性。冻存时,保护剂可促进细胞内水分渗出细胞外,从而减少胞内冰晶的形成;复苏时,促进胞外水分进入细胞,缓解渗透性肿胀引起的损伤。
细胞最易受损的温度:-5-0℃
细胞培养(cell culture):从体内组织分离细胞,模拟体内环境,在无菌、适当条件下使其生长繁殖的一种技术。
悬浮培养固定化培养..原代培养传代培养..分批培养流加培养半连续培养连续培养.灌流培养等
细胞培养可以有分批式、流加式、半连续式、连续式和灌流式5种操作方式。
细胞生长:5个阶段——延迟期、指数生长期、减速期、平台期和衰退期。
分批式培养的特点
⑴操作简单,培养周期短。
培养系统属于封闭式,培养过程中与外部环境没有物料交换,染菌和细胞变异概率低。除了控制温度、pH和通气量或搅拌速度外,不进行其他任何控制。
⑵直观反映细胞生长代谢过程。
一个相对固定的环境中,适合研究营养消耗、细胞生长、代谢产物积累规律。
⑶可直接放大。规模放大比较容易。
分批式培养的缺点
不能控制底物浓度、细胞易老化、生长周期短、效率低等。
反馈阻遏属于转录水平的酶量调节,产生效应慢,往往会影响催化一系列反应的多个酶;
反馈抑制是酶活性水平调节,产生效应快,一般仅对某一种酶起作用。
希望能够帮到你!
楼上的应该正确吧
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