【求助】caspase-3检测问题
丁香园论坛
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最近在做凋亡，在用凯基的caspase-3分光光度法试剂盒检测
细胞经过与药物孵育24小时后检测
用酶标仪检测，OD值在0.1-0.3之间，有一定浓度依赖，高浓度下caspase-3的活化程度有差不多4
问题在于，我用BCA蛋白定量得到的蛋白浓度时30多ug/ul，我加了有250ug，如果按照说明书的话，这个OD值应该在1左右，而我的最高才0.3.另外我的control孔（没加药）与我最低浓度的值差不多。
问题 1. 我的control孔的相对活化程度也有2，这是不是说明细胞状态不好呢。我的细胞密度是undefined10^6,6孔板2mL
2. 我这个结果可信不？还是可能因为我们的化合物还有其他非基于caspase-3的凋亡途径呢？
求解答。谢谢、
细胞经过与药物孵育24小时后检测
用酶标仪检测，OD值在0.1-0.3之间，有一定浓度依赖，高浓度下caspase-3的活化程度有差不多4
问题在于，我用BCA蛋白定量得到的蛋白浓度时30多ug/ul，我加了有250ug，如果按照说明书的话，这个OD值应该在1左右，而我的最高才0.3.另外我的control孔（没加药）与我最低浓度的值差不多。
问题 1. 我的control孔的相对活化程度也有2，这是不是说明细胞状态不好呢。我的细胞密度是undefined10^6,6孔板2mL
2. 我这个结果可信不？还是可能因为我们的化合物还有其他非基于caspase-3的凋亡途径呢？
求解答。谢谢、
您好，请问您做出来了吗？我也是用凯基的，测出来的值很小很小。我用六孔板养的细胞，测出来的蛋白量远超过了200ug，所以当时取了200ug测的，但是值好小呀。问凯基的技术支持，人家说六孔板细胞量不够，不知道您六孔板细胞量够吗？还有您后来做出来的结果咋样?有啥改进的地方没？好愁呀，希望得到您的帮助。急着毕业呀！
我用的是悬浮细胞，接板密度大于10e6个，用的量完全够。如果这样子的话可能是你的化合物并没有激活casp-3吧
你好，你以前应该用过caspase-3比色法检测试剂盒吧，虽然是很久以前的事了，用的是哪家公司的？效果怎么样？我用的是碧云天的，完全没效果，但是流式测试时有凋亡的，请大侠指教。谢谢！
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