心细北方
近期实验流式细胞仪PI染色法测细胞周期时只出现一个峰,不知道什么原因,求助一下?
huarenqiang5
1、首先确认你的细胞已经从G0/G1期出来了,其次G2 S期的细胞本来就比G1的要少,你可以加个G2期阻滞的化合物做个对照。
2、其次单染需要乙醇固定的时间长些,起码2小时以上,过夜也没问题。
3、乙醇不能用纯乙醇,需要70%的乙醇。
土井挞克树
检测一下机器设置是否忽略了其他峰,然后检测一下荧光是否工作正常。
loveliufudan
出现单一峰可能是因为测量的样本细胞数量太少,或者测量的细胞处于相同的细胞周期阶段。以下是一些可能导致出现单一峰的原因:
样本数量不足:流式细胞仪需要足够数量的细胞才能够提供准确的细胞周期分布结果。如果样本数量不足,可能会出现单一峰。
细胞处于同一细胞周期阶段:如果细胞都处于同一细胞周期阶段,那么测量结果就会出现单一峰。这可能是由于样本制备或处理方法不当导致的,例如在细胞分离或染色过程中出现损伤或误差。
测量条件不正确:如果流式细胞仪的设置或参数不正确,也可能会导致单一峰。例如,流速或激光功率过高可能会导致信号峰的重叠或误判。
为了确定原因,可以尝试以下方法:
增加样本数量:尽可能收集足够数量的细胞样本,以确保分析的准确性。
确认细胞处理和样本制备方法是否正确:可以通过显微镜观察细胞形态和状态,确认细胞处理是否准确无误。
调整流式细胞仪的设置和参数:根据仪器手册或经验,优化流速、激光功率等参数,以确保测量条件正确。