【求助】知道某启动子序列用什么方法将其克隆出来？
丁香园论坛
3565
1.知道某启动子序列用什么方法将其克隆出来？
2.将启动子碱基数太多，如何将其中某一段已知序列克隆？
2.将启动子碱基数太多，如何将其中某一段已知序列克隆？
设计引物,PCR
序列太长了，有5000多个碱基，那我是要把我启动子的其中一段用PCR扩增出来？？模板从cDNA文库中调取？？我们自己实验室没有cDNA文库，找哪个公司做比较好（广州）
启动子没有在cDNA文库中，在genomic DNA中，用DNA为模板才能扩出来。
candyjiang wrote:
序列太长了，有5000多个碱基，那我是要把我启动子的其中一段用PCR扩增出来？？模板从cDNA文库中调取？？我们自己实验室没有cDNA文库，找哪个公司做比较好（广州）
5000bp做PCR是可以的,记得选择合适的酶,你可以先用基因组DNA作模板,不行的话再考虑用文库,要用文库也应该是基因组文库.公司: CHORI (http://www.chori.org/). 记得查好克隆号(Clone-ID)
你好！希望我们公司可以帮到你，有意请加QQ：594051497
5000bp可以PCR出来，我们都做过很多个。要用基因组DNA作模板，选用针对困难模板的taq酶或长片段的taq酶进行扩增。再不行就设计引物分成2个片段分别PCR后把产品进行连接（可设计包含酶切位点的引物，PCR后酶切连接或直接进行平端连接），这样5000bp片段就得到了。
本公司提供40000多条人、小鼠、斑马鱼ORF/cDNA基因克隆，80多种表达载体，50多种融合标签，另外接受基因克隆服务，有意联系：15360479798，QQ:1598921096.(公司在广州的^-^)
本公司提供40000多条人、小鼠、斑马鱼ORF/cDNA基因克隆，80多种表达载体，50多种融合标签，另外接受基因克隆服务，有意联系：15360479798，QQ:1598921096.(公司在广州的^-^)
版主dnazyme留言:
凡是有广告或者广告嫌疑的，即使有帮助也不加分。
凡是有广告或者广告嫌疑的，即使有帮助也不加分。
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
