【求助】关于MSP

大家好，现在刚开始查这方面的资料。有很多疑问。
想问一下做过或在做这方面研究的前辈，请多多指教。

1.我想做血液样本的MSP，大概100个样本的话试剂大约需要多少费用？
2.请教各位前辈，一般大家单纯做MSP的话，周期多长？因为快毕业了，所以担心较难的话，可能做不完。

这个不难的，完全可以自己做。
你要测几个位点的甲基化，1个跟50个位点，价格肯定是不一样的。
一.先提血液基因组DNA，建议用kit吧，blood kit,约20元／样，预算2K
亚硫酸氢钠修饰，我觉的50块钱足够了。PCR按1元／反应成本计算，而纯化回收，以及测序，百来块钱／样品吧。如果你的反应数不多，100个样品，可能2万块钱足够搞定了。

MSP原理：MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA，未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变，然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳，凝胶扫描观察分析结果

二、亚硫酸氢钠修饰基因组DNA 。
1：将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用DDI稀释至50ul；
2：加5.5ul新鲜配制的3M NaOH；
3： 42℃水浴30min；
水浴期间配制：
4：10mM对苯二酚（氢醌），加30ul至上述水浴后混合液中；（溶液变成淡黄色）
5： 3.6M亚硫酸氢钠（Sigma，S9000），配制方法：1.88g亚硫酸氢钠使用DDW稀释，并以3M NaOH滴定溶液至PH 5.0，最终体积为5ml。这么大浓度的亚硫酸氢钠很难溶，但加入NaOH后会慢慢溶解，需要有耐心。PH一定要准确为5.0。加520ul至上述水浴后溶液中。
6：EP管外裹以铝箔纸，避光，轻柔颠倒混匀溶液。
7：加200 ul 石蜡油，防止水分蒸发，限制氧化。
8：50℃避光水浴16h。
一般此步在4pm开始做，熟练的话不到5pm即可完成，水浴16h正好至次日8am以后收，时间上很合适。
后面的PCR和纯化回收以及测序从略，这个应该每个人都会。

非常感谢