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【求助】我做信号通路,选用HepG2细胞。请高手教我细胞该怎么处理哦?

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1889
我做TNF处理HepG2细胞,然后测定细胞通路的变化。
问题是,细胞如何处理哦?
1、细胞加TNF前,一般需要饥饿多少小时才能消除血清对细胞的影响?
2、细胞饥饿后(我选的8h),而且加TNF的时候又不能加血清(因为血清含细胞因子,而且好像血清对信号通路有影响),细胞处理时间最长是24h。这样的花8h+24h=32h。细胞好像撑不住。。。。
这问题如何解决哦?请高手指教!不盛感激
关注中,我也打算做细胞通路。不知道你是什么模型呢
这个你需要做预实验的,当你把细胞的medium换成DMEM以后,就没有血清的影响了,当然在你换为DMEM的时候,一定要先用DMEM洗一下细胞,然后再换就可以了。还有就是HEPG2 cell,我饥饿过48小时,都没有问题,所以你可放心的去做。
我很郁闷,一饥饿就死了。。。。。
已经是第4次了。。。。
如三楼所说的,饥饿对HepG2都没什么影响,我最多饿到72小时还是照样活着。

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师兄微信号:shixiongcoming

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