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【求助】关于启动子方面的研究问题

丁香园论坛

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各位老师:
想请教一下,我在做启动子转录活性方面的研究,做下来的结果是某一启动子位点的突变影响了它的转录活性,如果想继续研究下去,不知道还能从哪方面着手?有什么思路呢?谢谢各位了
多看文献,文献看到30篇了,你就会有不少想法了。
嗯,我也看了不少了!就是感觉没有什么好的思路!真是郁闷啊!
1. 该promoter有没有被什么protein结合,该promoter是否受该protein调控;调控方式;Methylation?acetylation?

2. 该promoter活性受影响后其他相关反应有没有受到影响,以及受到影响的程度;比如免疫反应
看楼上的大肚子就知道是吃丁当吃多了
最简单的方法就是,构建含有你突变位点启动子的载体转染入细胞,看你目的基因的表达情况。
你说的‘构建含有你突变位点启动子的载体转染入细胞,看你目的基因的表达情况’这个实验我已经做过了,我是想继续研究启动子的结构与功能
不好意思,没看明白你的问题。
可以针对你的突变位点预测在这位点上的motif,设计探针,用EMSA来检测DNA-蛋白质的相互作用。或者选择相应抗体用chip来检测何种转录因子影响你目的基因的表达。

http://motif.genome.jp/MOTIF2.html这是一个Motif在线查找。也可以用软件如Primer5等。

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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