【求助】激活wnt的几种方法
丁香园论坛
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本人刚刚开始做实验,有关wnt通路的检测,想请教激活wnt通路的方法,看资料主要有三种:
1,加wnt蛋白
2,LiCl抑制gsk3β
3,转染wnt质粒或者点突变的β-catenin质粒
不知哪种方法可行,具体如何操作呢
非常感谢!!!
1,加wnt蛋白
2,LiCl抑制gsk3β
3,转染wnt质粒或者点突变的β-catenin质粒
不知哪种方法可行,具体如何操作呢
非常感谢!!!
加wnt3a,看过一篇CANCER CELL是这样激活的
我也准备做关于wnt通路的,我做侵袭方面的。楼主可否多多交流。向你学习?QQ674693586.忘多指教
向楼主强烈推荐Cell上的一篇Review:
Wnt pathway activation: new relations and locations, Cell. 2005 Jan 14;120(1):11-4.
The full size paper can be available at the following website:
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WSN-4F7PRGS-5&_user=1111158&_coverDate=01%2F14%2F2005&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=1359876227&_rerunOrigin=google&_acct=C000051676&_version=1&_urlVersion=0&_userid=1111158&md5=752344f3bcf0bfce135a64d4e2b1a077
Wnt pathway activation: new relations and locations, Cell. 2005 Jan 14;120(1):11-4.
The full size paper can be available at the following website:
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WSN-4F7PRGS-5&_user=1111158&_coverDate=01%2F14%2F2005&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=1359876227&_rerunOrigin=google&_acct=C000051676&_version=1&_urlVersion=0&_userid=1111158&md5=752344f3bcf0bfce135a64d4e2b1a077
我也正在做这方面的实验,准备买点LiCl来试试
最近试了LiCl激活Wnt通路,效果不错。
但不同的细胞所需的LiCl浓度不一样,以我做的两种细胞系来说:293T细胞在20mM和50mM LiCl作用才有有效的激活,而NIH3T3在20mM时不表现出激活,在50mM时才有作用
但不同的细胞所需的LiCl浓度不一样,以我做的两种细胞系来说:293T细胞在20mM和50mM LiCl作用才有有效的激活,而NIH3T3在20mM时不表现出激活,在50mM时才有作用
LiCl 需要刺激多长时间呢
做脂肪干细胞的LiCl浓度是多哦少啊??
??http://www.stanford.edu/~rnusse/wntwindow.htmlp 这是一个斯坦福大学WNT专业的网站,你想知道的大部分知识都有。请大家参考。
最好不要买商品化的wnt3a做激动剂,我们实验室用过,效果不好,后来查文献才知道wnt3a要经过棕榈酰化后才有活性,而在纯化的过程中棕榈酸经常被除去了,所以买的商品活性很差,很多人用表达wnt3a的L细胞产生的上清来激活WNT。这方面文献很多。
lily628 wrote:
??http://www.stanford.edu/~rnusse/wntwindow.htmlp 这是一个斯坦福大学WNT专业的网站,你想知道的大部分知识都有。请大家参考。
学习了
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming