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【求助】研究细胞膜分子下游信号转导通路的方法和思路?

丁香园论坛

3104
最近在做一个膜分子及其配体的相互作用,下一步想研究其激活后下游的信号转导途径,不知道大概的思路和具体的方法是什么啊?利用基因芯片和蛋白芯片吗?还是有什么其他的方法?
希望大家提供一点想法,先多谢大家了啊!
这个问题在其他版也求助过,但是不太积极,希望在这个版能够得到一个大概的思路和方法。
这类命题,JBC上每年文章甚多。采取何种研究思路,我认为
1、首先关键要整理文献,以前此类有无研究此类配体与其受体结合的研究概例?
2、如果无前例,该配体所属家族成员,有无信号通路研究的前例?
3、该配体的受体主要分布于什么细胞?这类细胞在生命活动中扮演了什么角色?这种细胞的生理特性,主要通过哪些信号通路反映出来?
4、比较经典的一个例子是干扰素与其受体结合后,引起下游信号分子的变化,包括激活抗病毒因子等。楼主可以参阅相应文献。
感谢版主的回答,我的意思就是如果知道了一对分子的相互作用,如果要研究这对分子相互结合(激活)后下游的分子信号传导途径,我个人在想是不是使用蛋白芯片是一个选择,不知道还有什么叫新的技术,可以进行下游细胞信号转导的初筛。
打个质谱就行
普通学生 wrote:
感谢版主的回答,我的意思就是如果知道了一对分子的相互作用,如果要研究这对分子相互结合(激活)后下游的分子信号传导途径,我个人在想是不是使用蛋白芯片是一个选择,不知道还有什么叫新的技术,可以进行下游细胞信号转导的初筛。

虽然现在的趋势流行用程序等其他非生物手段先模拟预测,但是这些结果最后都需要经过生物学手段证实,否则意义不大。

因此建议你与其去想程序上有没有什么新方法,不如听听别人的意见,看看你所说的这两种分子以前主要已经有了哪些确定的上下游作用、哪些ligand、enzyme跟它们有关系,会导致什么结果等等。

如果做不了分子水平,就先从细胞水平设计,比如subcelluar定位等等。
bigbang_0_0战友说的质谱确实是一个可行的办法,但是可能还牵涉到后续的二维电泳和氨基酸测序吧?能不能把详细的步骤稍微说一下,对这个不太了解。
LoftyMan的建议也很好,但是不知道用软件预测的大概概率是多少,我知道最后肯定是需要实验来验证,但是如果预测的出现了方向性的错误,那不是白忙吗?还有不知道LoftyMan推荐一下比较好的预测软件或者在线的数据库。
多谢楼上两位的解答。
普通学生 wrote:
bigbang_0_0战友说的质谱确实是一个可行的办法,但是可能还牵涉到后续的二维电泳和氨基酸测序吧?能不能把详细的步骤稍微说一下,对这个不太了解。
LoftyMan的建议也很好,但是不知道用软件预测的大概概率是多少,我知道最后肯定是需要实验来验证,但是如果预测的出现了方向性的错误,那不是白忙吗?还有不知道LoftyMan推荐一下比较好的预测软件或者在线的数据库。
多谢楼上两位的解答。

我对软件不熟悉,你可以在下面这张帖子里面跟楼主联系一下,他是学习这方面的

http://bbs.taisha.org/viewthread.php?tid=1469607&page=2#pid16864309
多谢楼上的提示。
我觉得可能还是先筛选一下常见的信号通路比较可行。

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