【求助】如何证明GSK-3beta的抑制是由Wnt通路引起的?
丁香园论坛
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我现在能够证明GSK-3beta的活性受到了抑制,同时也证明了b-catenin在核内和胞浆内的表达都升高了,同时胞浆内的磷酸化b-catenin含量降低(Wnt通路被激活了吗)。另外Akt的磷酸化增高(应该是PI3K/Akt通路被激活了)。因为Wnt和PI3K/Akt两条通路都可以抑制GSK的活性。 请问能否判断GSK的抑制是由Wnt通路的激活引起的,还是有PI3K/Akt的激活引起的?还是两条通路都激活了?
(暂时我还不能进行其他的实验,只能通过这些数据进行分析)
因为这两条通路都可以调节GSK的活性,所以不知道该如何做结论。
(暂时我还不能进行其他的实验,只能通过这些数据进行分析)
因为这两条通路都可以调节GSK的活性,所以不知道该如何做结论。
在wnt通路中GSK在b-catenin的上游,通过控制b-catenin的磷酸化调节其稳定性。你实验只是检测到b-catenin表达量升高了,怎么能说明GSK的抑制是由Wnt通路引起的呢?如果不加实验再进行验证的话,我觉得说可能是AKT激活了,从而抑制了GSK活性,使b-catenin稳定性提高表达量升高,这样更合理点,。
msniu wrote:
在wnt通路中GSK在b-catenin的上游,通过控制b-catenin的磷酸化调节其稳定性。你实验只是检测到b-catenin表达量升高了,怎么能说明GSK的抑制是由Wnt通路引起的呢?如果不加实验再进行验证的话,我觉得说可能是AKT激活了,从而抑制了GSK活性,使b-catenin稳定性提高表达量升高,这样更合理点,。
AKT可以通过抑制GSK来调节b-catenin的稳定性吗?
图示可能更清楚一点
有人回答吗?
做个RNAi不行吗?把Wnt通路相关蛋白敲低,或者把PI3K/Akt敲低,或者两个全敲低,看看GSK-3beta的活性还能不能呗抑制?
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