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【求助】想证明A通过B作用于C!!!

丁香园论坛

2801
请教一下各位高手:
想证明A通过B作用于C,A→B→C。
已知A对B有肯定作用,是否证明了B对C的作用,就能证明A通过B作用于C呢?
谢啦!!!
不能,也许A可以通过其他途径作用于C。首先你要把A——>C弄通,然后中间抑制B,看对C的影响。同时中间要检测B是否变化(磷酸化,或总蛋白水平等)。

A对B有肯定作用,证明了B对C的作用,只能说A可能通过B作用于C。
1.先证明A可作用于C。
2.抑制B,观察A对C的作用是否也被抑制了。
3.如果2中的结果是A对C的作用被完全抑制的话,则说明A可通过B作用于C(很可能B是唯一的途径),此时可再研究A对B的作用,从而提供A是通过何种方式调节B从而干预C的。
4.如果2中的结果是A对C的作用被部分抑制的话,则说明A可通过B作用于C(但B不是唯一的途径,很可能还有其他途径并行参与了对C的调控)。
4.如果2中,抑制B的条件下A对C的作用没有被抑制,则说明A并非通过B来调控C的,很可能有其他旁路途径进行对C的调节。
谢谢!我研究的是A这种药的可能作用机理,受到不少启发!!
magichunter wrote:
3.如果2中的结果是A对C的作用被完全抑制的话,则说明A可通过B作用于C(很可能B是唯一的途径),此时可再研究A对B的作用,从而提供A是通过何种方式调节B从而干预C的。
4.如果2中的结果是A对C的作用被部分抑制的话,则说明A可通过B作用于C(但B不是唯一的途径,很可能还有其他途径并行参与了对C的调控)。


magichunter战友说的有道理,但有的地方我不太同意,发表一下自己的看法。

很多情况下,B很难被完全抑制,更不用说C被完全抑制了。所以我觉得唯一途径不是那么好证明的。
已经收入专题讨论】如何开展信号转导中分子间充分、必要、充要条件论证?加分从优!! [精华]
http://www.dxy.cn/bbs/thread/15183326

不错的讨论望继续!
我想知道的问题是:这是不是要阻断A的基础上阻断B 才能知道A是不是通过B对C起作用呢?如果是的话, 我做RNAi,做得是瞬时转染,可以不可以做呢 ?如果可以的话,两个干扰序列要同时导入吗?
阻断B时,应该采用不同的方法,并且了解不同的方法的抑制程度。

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