【求助】如何实验证明一种分泌蛋白是自分泌作用还是旁分泌作用？
丁香园论坛
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请教大家如何实验证明一种分泌蛋白是自分泌作用还是旁分泌作用？谢谢！
我不知道你说的情况是什么样的情况，如果是养的细胞的话，那是不是不会出现这样的问题。如果是机体的话，你的这个问题就太复杂了，因为如果搞清楚了至少也是一篇10分的文章吧？如果要证明，也就只能是原代培养，分离组织挑单克隆培养细胞，然后进行鉴定了。单个细胞的话这个问题应该是能够解决了吧？
唯一的方法就是免疫组化！
我觉得用一种可以大致定位的实验办法，如看到他分泌的目的部位就可以了；例如：加一种荧光示踪或者别的标志物或者用它作用的部位细胞的特异性标志物做免疫组化。
我提供一个思路，呵呵，要特定的分泌蛋白，我们以前实验室做的。
如果这个分泌蛋白是一种致肿瘤的蛋白，这个是前提啊。克隆出这个基因，真核表达并稳定转染，然后将稳定转染的细胞接种裸鼠的皮下，如果只在接种部位局部产生肿瘤，提示主要以自分泌的形式发挥作用，如果在邻近部位产生肿瘤提示可能有旁分泌，远处产生的话则提示还可能有内分泌形式。
呵呵，抛砖引玉。
如果这个分泌蛋白是一种致肿瘤的蛋白，这个是前提啊。克隆出这个基因，真核表达并稳定转染，然后将稳定转染的细胞接种裸鼠的皮下，如果只在接种部位局部产生肿瘤，提示主要以自分泌的形式发挥作用，如果在邻近部位产生肿瘤提示可能有旁分泌，远处产生的话则提示还可能有内分泌形式。
呵呵，抛砖引玉。
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