【求助】利用流式细胞仪检测乳酸菌的细胞膜完整性
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我的实验:利用流式细胞仪检测乳酸菌的细胞膜完整性,采用荧光染料PI染色,样液只是乳酸菌的纯培养液,没有其它杂菌,得到的流式细胞二维图,见附件,左下为活细胞,右下为死细胞。发表文章后,编辑让我解释四个象限,并问为什么“左下为活细胞,右下为死细胞”。第二个编辑问的问题就更麻烦了:I miss percentage values on the quadrants and maybe a pseudocolour plot to better evaluate the amount of dead cells. Furthermore a forward/side scatter (FSC/SSC) plot showing the gating of figure 4。什么是a pseudocolour plot?我只做了 SSC,我查资料都只做ssc,为什么还要做FSC(forward scatter)?肯请各位战友帮忙处理一下,图见附件。 谢谢!
PI染色上流式,活菌对PI拒染,因此PI相应的荧光检测。
而PI能通过死菌的细胞膜,将其DNA染上红色,因此有PI相应的荧光检测。
而PI能通过死菌的细胞膜,将其DNA染上红色,因此有PI相应的荧光检测。
pseudocolour是利用其他颜色显示各区域,例如左下部分可用绿色表示活菌,右下部分用现在的红色表示已染PI。在做流式时,是有FSC/SSC数据的,不用再做。从FSC/SSC中可以看出你分析样品的范围。
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