【求助】U6启动子种属特异性问题？？

丁香园论坛2015-08-21

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mengxiaoyong

小弟要在绵羊上做RNAi，不知人源，鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能？哪位大侠知道呀？先谢了！实验室里有U6或H1启动子载体！

Fasta921

mengxiaoyong wrote:
小弟要在绵羊上做RNAi，不知人源，鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能？哪位大侠知道呀？先谢了！实验室里有U6或H1启动子载体！

shRNA表达质粒多采用RNA聚合酶III启动子，如人源H1或鼠源U6启动子，pol III在哺乳动物细胞（绵羊是哺乳动物）内引导非编码小RNA的转录，转录产物无poly(A)尾，且在转录过程中遇到连续4-5个U时转录终止。此载体最后转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA(shRNA)； shRNA 在细胞内被Dicer酶切割成3’端带有两个U突出的siRNA，进而启动RNAi，介导基因沉默。载体中的间隔序列为9个核苷酸时最为有效。

是可行的！

高成胡君

不知道LZ现在没有搞清楚种属之间的差异，我也很想知道答案

xue西

我也很想知道，关于U6的种属问题

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