【求助】瞬时转染的细胞，再做间接免疫荧光，期间血清是加还是不加啊
丁香园论坛
2188
刚刚做了PC12细胞瞬时转染NF-kB-decoy的DNA，之后加药刺激，然后想要做间接免疫荧光检测其表达，因为转染之后的细胞已经铺满达100%，不是自然伸展的状态了，是不是要把细胞消化下来，重新铺到盖玻片上啊，这时候需要贴壁24h还是要48h呢，因为PC12细胞在贴壁24h后，还不能完全达到自然伸展的状态，而瞬时转染这时候已经过了3-4天了，会不会已经看不出瞬时转染的效果了？哪位师兄师姐做过类似的实验，给我点建议吧，十分感谢
细胞系转染实验时，应在细胞没有长满时进行。
如果仅仅是简单的组化、WB分析转染产物表达结果，则在细胞70%长满时进行。
如果还有后续实验，则可以在50%满时进行转染。
在观察转然后细胞细节改变时，在30%满时转染。
如果仅仅是简单的组化、WB分析转染产物表达结果，则在细胞70%长满时进行。
如果还有后续实验，则可以在50%满时进行转染。
在观察转然后细胞细节改变时，在30%满时转染。
如果是瞬时转染的细胞,是很脆弱的,恐怕经不起消化的.一消化,估计直接就变细胞碎片了
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
