果蝇唾腺染色体的制备与观察

一、实验目的
1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法
2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征

二、实验原理
果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体
唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体
唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料

三、实验材料与器具
三龄幼虫
0.9%生理盐水
胭脂红染色液
解剖镜 解剖针 吸水纸

四、实验步骤
(1)剥离唾腺
　在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
　　每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
　　唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。

果蝇唾腺剥离示意图


(2)染色： 吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min
(3)压片： 染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层 滤纸 。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片移动。）