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ABO血型鉴定原理和方法步骤

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【 目的和原理 】
血型(blood group)就是红细胞上特异抗原的类型。在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否含有A、B抗原而分为A、B、AB、O型。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清(standard serum A)(含足量的抗B抗体)与标准B型血清(standard serum B)(含足量的抗A抗体)中,观察有无凝集现象,从而测知受试者红细胞上有无A或/和 B抗原。

交叉配血(cross-match test)是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合,观察有无凝集现象。为确保输血的安全,在血型鉴定后必须再进行交叉配血,如无凝集现象,方可进行输血。若稍有差错,就会影响受血者的生命安全,千万不可粗心大意。

【 实验材料 】

人;显微镜、 离心机 、采血针、玻片、滴管、1ml吸管、小 试管 、 试管 架、牙签、消毒注射器及针头、碘酒、棉球、消毒棉签;标准A、B型 血清 、生理盐水、75%酒精。

【 实验步骤 】
1.玻片法
(1)将标准A型与B型 血清 各一滴,滴在玻片的两侧,分别标明A与B。
(2)用75%酒精棉球消毒左手无名指端,用消毒采血针刺破皮肤。滴1滴血于盛有 lml生理盐水的小 试管 中,混均制成红细胞悬液(浓度约5%)。
(3)用滴管吸取红细胞悬液,分别滴一滴于玻片两侧的血清上,用两支牙签分别混匀(注意严防两种血清接触)。
(4)15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据图40判定血型。

2. 试管 法

取小试管 2支,分别标明 A、B字样。分别加入A、B型标准血清与受试者的红细胞悬液各1滴,混匀后离心1分钟(100转/min)。取出试管后用手指轻弹试管底,使沉淀物被弹起,在良好的光源下观察结果。轻弹管底时,若沉淀物成团漂起,表示发生凝集现象,若沉淀物边缘呈烟雾状逐渐上升,最后使试管内液恢复红细胞悬液状态,表示无凝集现象。

【 注意事项 】
1.试管法较玻片法结果准确。
2.吸A型、B型标准血清及红细胞悬液时,应使用不同的滴管。
3.肉眼看不清凝集现象时,在低倍显微镜下观察。
4.红细胞悬液及标准血清须新鲜,因污染后产生假凝集。
5.红细胞悬液不能太浓或太淡,否则可出现假阴性反应。

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