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ABO血型鉴定实验原理与方法步骤

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【实验目的】

1. 理解间接鉴定血型的原理。

2. 掌握人体ABO血型鉴定的方法。

【实验原理】

血型是指红细胞膜上特异性抗原的类型,通常红细胞血型即为血型。将血型不相容的两个人的血液滴于玻片上红细胞将聚集成簇,这种现象称为凝集。红细胞凝集的机制是抗原-抗体反应,即位于红细胞膜上的抗原与相应血清中的抗体(凝集素)发生免疫反应。在ABO血型系统中,血型鉴定就是将检测血液分别加入已知含有A或B凝集素的标准血液中,观察凝集现象是否发生,用以判断待检血液红细胞上含何种凝集原,由此确定待检血液的血型。

【实验对象】

人。

【实验器材与药品】

采血针,玻片,玻棒,棉球,消毒注射器,小 试管 ,记号笔;标准A、B血清,生理盐水,75%酒精,碘酒。

【实验方法和步骤】

1. 玻片法:用记号笔在玻片两端分别标上A、B,并各滴加一滴相应的已知标准血清。用75%酒精棉球消毒耳垂或指端,以消毒针刺破皮肤,玻棒采血后分别滴于玻片A、B标准血清中。2~5分钟后观察有无凝集现象,20~30分钟后再根据有无凝集现象判定血型。

2. 试管 法:先用上述方法采血,滴加1~2滴血液于盛有1ml生理盐水的小试管中混匀,制成红细胞悬液(浓度约5%)。然后取小试管两支,分别标明A、B字样。各加入标准 血清 与受检红细胞悬液各1~2滴,混匀后低速离心1min(1000rpm),取出试管后轻弹管底,使沉淀物被弹起,在良好的光线下观察结果。若有沉淀物成团飘起,表示发生凝集现象;若沉淀之物呈烟雾状逐渐上升,最后试管内液体恢复红细胞悬液状态,则表示无凝集现象。

【注意事项】

1. 试管法较玻片法结果准确。

2. 若结果判断困难时,可借助显微镜。

3. 用玻璃棒蘸血时,都是只蘸一次,避免交叉污染。

4. 红细胞悬液及 血清 必须新鲜,加用标准血清的 试管 不能交叉使用,否则可能出现假阳性结果。

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