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挑细胞单克隆

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wo4haoren:,小弟正在用G418筛选单克隆,用的是平皿,一个平皿长了大概几百个吧,但是怎么把单克隆消化,转板呢? 没有想到好的方法,想定点消化,发现胰酶会很快扩散,消化到其他克隆,很郁闷,有做过的大侠交流下经验,不胜感激!

丁香园网友cmingwen认为:

可以用枪头或者是无菌的东西把单克隆刮下来,再放在孔板培养,应该可以!

丁香园网友xinyinhancidian认为:

一般是用克隆环,根据克隆的尺寸买克隆环。

克隆环类似于空心塑料环,将底部稍微蘸一些无菌的凡士林,在皿中的液体被吸干后(准备消化),一个一个扣住每一个你想挑的克隆,加少量胰蛋白酶到克隆环中,消化,加带血清培养基中和,用枪头将每个环内的细胞吸出来,小离心管离心收集细胞,种到48孔甚至96孔板里(看细胞多少)。

当克隆数目较多时,注意不要让细胞风干了,动作快点,而且每个孔中预先加一点点PBS,不会影响酶消化。

Corning 有卖,会比较贵,国内不知道哪里有价格合适的。

好像前面有帖子说自己用枪头制作克隆环的,具体如何操作,你去看看。

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