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检测抗DNA(ssDNA和dsDNA)抗体知识问答

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23038

1957年Ceppelini等首次报道了系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清成分可与DNA发生反应,随后建立了几种定性和定量检测抗DNA抗体的方法。随着研究的不断深入,发现定量检测IgG型抗DNA抗体对SLE更具诊疗参考价值。在SLE患者的血清中存在三种类型的抗DNA抗体,其中的抗dsDNA和抗ssDNA最常见也最常用。本文以问与答的形式围绕两种抗体的应用向读者逐一介绍。

问:抗ssDNA抗体存在于多种疾病中,检测它有哪些临床意义?

答:抗ssDNA抗体除在SLE患者血清中检测到以外,还可出现在在药物诱导性狼疮(DLE)、类风湿关节炎等多种自身免疫性疾病患者中。与抗dsDNA抗体相比,抗ssDNA对SLE的特异性虽低于抗dsDNA抗体,但并非没有临床意义。抗ssDNA对提高SLE诊断以及预示疾病的作用不容忽视。检测抗ssDNA临床意义如下:

♦ 检测抗ssDNA有助于减少仅有抗ssDNA阳性而临床表现符合SLE患者漏诊,提高SLE诊断率。

♦ 抗ssDNA的阳性结果能够验证抗dsDNA阳性结果的可靠性。研究表明:抗dsDNA阳性时,其抗ssDNA结果也为阳性;但抗ssDNA阳性时,抗dsDNA不一定阳性。两种抗体检测结果的参考方法如下表:

抗dsDNA抗体 抗ssDNA抗体 结果分析与判断
阳性(+) 阴性(-) 抗dsDNA抗体单一阳性,建议复测,结果仍为此可做随访
阳性(+) 阳性(+) 抗DNA抗体结果阳性,SLE可能性大
阴性(-) 阳性(+) 抗ssDNA抗体阳性,SLE、DLE可能性大,需结合临床确诊
阴性(-) 阴性(-) 抗DNA(ssDNA和dsDNA)抗体结果阴性

♦ 高水平的抗ssDNA是活动性SLE的一个指标。抗ssDNA抗体水平的增加是SLE患者增加抗dsDNA抗体水平和疾病活动的早期预示。仅存在抗ssDNA和抗组蛋白抗体提示DLE。

综上所述,抗ssDNA抗体不但具有临床应用价值有必要检测,其与抗dsDNA抗体联合检测时更有意义。

问:为什么定量检测抗ssDNA和抗dsDNA抗体的诊疗参考价值更高?对定量结果的参考有何建议?

答:单纯就定性和定量本身而言,定量结果由于能在定性基础上反映偏离正常值的程度,优于定性检测结果。在检验与临床最棘手的弱阳性和高阴性检验结果中定量结果比单纯的定性包含更多的参考信息。

临床研究表明:抗dsDNA抗体定量检测不仅能准确反映患者检测结果偏离正常值的程度,而且抗体水平变化与病情活动相关,即病情活动、加剧时,抗体阳性且水平升高;病情缓解、稳定时,抗体水平降低甚至转阴。为此,WHO制定了抗dsDNA抗体国际溯源品Wo/80。这不仅肯定了抗dsDNA定量检测的重要,同时也为定量检测提供了国际权威参考。抗ssDNA抗体水平的变化也提示病情变化。以上海科新的抗dsDNA和抗ssDNA两种检测试剂盒正常参考范围为例,定量检测结果的参考建议如下:

定性判断 抗dsDNA(IU/mundefined) 抗ssDNA(RU/mundefined) 诊断建议
可疑 ± 90~110 18~22 临界区域,建议复测或随访
弱阳 110~150 22~26 参考其他诊断指标,建议随访
阳性 ++ 150~400 26~100 疾病可能性大,结合临床诊断
中阳 +++ 400~800 100~200
强阳 ++++ >800 >200


问:检测抗dsDNA抗体有哪些方法,不同方法学有何特点?

答:目前实验室检测抗dsDNA抗体的方法主要有放免法、间接免疫荧光法、斑点免疫金渗滤法、免疫印记法和酶联免疫(ELISA)法。各种方法由于抗原来源不同、抗原展现形式不同、实验体系的反应条件不同,检测结果不具可比性。不同方法学检测抗dsDNA抗体的检测原理、优缺点及推荐方案见下表:

综上所述,抗DNA抗体的最佳推荐检测方案为:采用ELISA法联合定量检测抗dsDNA和抗ssDNA。已经开展的检测方法中,我们不推荐使用斑点免疫金渗滤法和免疫印迹法检测抗dsDNA抗体。

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