原理
包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释,于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗涤缓冲液洗3次,每次3 min。
加样:加适当稀释的待检样品(未知抗体)于反应孔中,同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h,洗涤。
加B-Ab2:加稀释过的生物素化抗抗体(抗人或鼠等的IgG),每孔0.1 ml,37 ℃孵育30~60 min,洗涤。余下步骤同测未知抗原的BA-ELISA。
加样:加适当稀释的待检样品(未知抗体)于反应孔中,同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h,洗涤。
加B-Ab2:加稀释过的生物素化抗抗体(抗人或鼠等的IgG),每孔0.1 ml,37 ℃孵育30~60 min,洗涤。余下步骤同测未知抗原的BA-ELISA。
材料与仪器
步骤
来源:丁香实验