ELISA夹心法和竞争法在Excel中拟和曲线
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一、双抗夹心法拟和曲线
打开EXCEL软件;在工作表中输入第一行: 浓度值, 如0 10 50 100 400
输入第二行:该浓度下的调整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法,在公司已经提供的图表上, 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和新的曲线。
二、计算浓度
举例
第一次实验:
标准曲线为:
y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1
R2 = 0.9745 为例,已知OD值,计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +(y-0.1)=0
ax2 +bx +C=0
a=4E-05;b= -0.026; C= y-0.1
x=(-b-(undefinedb-4a(y-0.1))(平方根)) /(undefineda)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.02undefined0.026-0.0001undefined(y-0.1))(平方根))/(undefined0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.02undefined0.026-0.0001undefined(y-0.1))/2))/(undefined0.00004)
通用公式为: Y=ax2 +bx +C
x=(-b-EXP(LN(undefinedb-4a(y-c))/2))/(undefineda)
您可以应用excel的公式拷贝功能,计算所有浓度。
简化方法
如果有示例的excel表格,过程可参照附件的EXCEL表格,您的新数据可以这样拟和:双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
根据曲线方程序,更改公式的参数,计算出浓度。
三、竞争法拟和曲线
Logit-log 直线回归
竞争法一般情况下用Logit-log 直线回归的方法可以拟和成近似一条直线;
令 p = OD/OD0, q = 1 - p,
y = ln (p / q), x = lg (浓度),
其中: OD 为反应值,
OD0 为浓度为 0 的反应值的均值,
则方程为:
y = a + undefinedx