原理
选用2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb，1种McAb作为包被抗体，另1种McAb标记辣根过氧化物酶（HRP）作为结合物，催化底物显色。根据标准品OD值绘制标准曲线，在标准曲线上查出待检标本的含量。
材料与仪器
包被抗体 酶标抗体 标准品 ABTS底物
缓冲液 洗涤液 稀释液 终止液
ELISA板
缓冲液 洗涤液 稀释液 终止液
ELISA板
步骤
1. 向ELISA板中加入稀释好的包被抗体100 μl/孔，4 ℃ 24～48 h
2. 洗3次，加入10倍连续稀释的待测标本（做4个稀释度即可）或倍比稀释的标准品（6个稀释度）100 μl/孔，37 ℃，1 h
3. 洗3次，加入稀释好的酶标抗体100 μl/孔，37 ℃，45 min
4. 洗4次，加入配好的ABTS底物液100 μl/孔，RT，30 min
5. 测410 nm OD
2. 洗3次，加入10倍连续稀释的待测标本（做4个稀释度即可）或倍比稀释的标准品（6个稀释度）100 μl/孔，37 ℃，1 h
3. 洗3次，加入稀释好的酶标抗体100 μl/孔，37 ℃，45 min
4. 洗4次，加入配好的ABTS底物液100 μl/孔，RT，30 min
5. 测410 nm OD
6. 绘标准曲线
注意事项
1. 待检标本必须无污染，无溶血。
2. 标本稀释后加入ELISA板时，注意从低浓度向高浓度依次加入。
3. 结合物稀释液和底物缓冲液中禁止加入叠氮钠。
2. 标本稀释后加入ELISA板时，注意从低浓度向高浓度依次加入。
3. 结合物稀释液和底物缓冲液中禁止加入叠氮钠。
来源：丁香实验
