伤口愈合/细胞划痕实验新方法分享
互联网
7386
细胞划痕实验是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移的体外试验方法。
这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。
基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
优点：
1，在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2, 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。
3，与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。
4，研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。
传统实验方法
实验步骤：
1，培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记（方便拍照时定位同一 个视野）。
2，细胞消化后接入12孔板，数量以贴壁后铺满板底为宜（数量少时可培养一段时间至铺满板底）。
3,，细胞铺满板底后，用1ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致。（人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法最大的缺陷。）
4，吸去细胞培养液，用PBS冲洗孔板三次，洗去划痕产生的细胞碎片。
5，加入无血清培养基，拍照记录。
6，将培养板放入培养箱培养，每隔4-6小时取出拍照。
7，根据收集图片数据分析实验结果。
Culture Insert方法
1，准备细胞，培养液，culture Insert。
2，将细胞接种于Dish中间的Insert，细胞长满Insert 区域后用镊子移除Insert即可产生500μm宽度的划痕。
3，每隔4-6小时拍照记录。
4，根据收集图片数据分析实验结果。
参考文献：
J. Y. Chen, Y. A. Tang, S. M. Huang, H. F. Juan, L. W. Wu, Y. C. Sun, S. C. Wang, K. W. Wu, G. Balraj and T. T. Chang
Cancer Research, 2011, 10.1158/0008-5472.CAN-10-1303
