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果蝇唾腺染色体

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13311

实验三 果蝇唾腺染色体

【实验目的】

1.练习取出果蝇幼虫的唾腺和制作唾腺染色体标本的方法与技术。


2.观察和识别多线染色体的特征:


a.巨大,多线;


b.染色体配对,染色体只有体细胞的半数(n);


c. 染色体含异染色质多的着丝粒部分互相靠 拢 ,形成染色中心(chromo center) ;


d.横纹有深、浅、疏、密不同,而且各自对应排 列,这意味着基因的排列。


3.练习绘制多线染色体图。
【实验原理】

双翅目昆虫(果蝇、摇蚊等)幼虫期的唾腺细胞很大,其核内的染色体称为唾腺染色体(Salivary chromosome)。由于它们比普通染色体大100-150倍,宽约5μm,长约400μm,因而也称为巨大染色体(giant chromosome)。另外唾腺染色体经多次复制(212=4096)而不分开,所以又称作多线染色体(polytenic chromosome)。唾腺染色体经染色后出现深浅不同,疏密有别的横纹,这些横纹的数目和位置常常是恒定的,标志着物种的特征。当染色体上有结构畸变,如缺失、重复、倒位、易位等,很容易在唾腺染色体上鉴别。


实验 仪器 、材料和 试剂 】

实验器具: 解剖镜、显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸。


实验药品: 0.7%生理盐水、1mol盐酸、 蒸馏 水、改良品红。


实验材料: 黑腹果蝇任一品系或杂交种的已爬上管壁, 尚未化蛹的三龄幼虫。
【方法与步骤】

1.把载坡片放于解剖镜载物台上(用黑背景)加上—滴生理盐水,把果蝇三龄幼虫移入其中,左手持解剖针按住幼虫前端1/3处固定幼虫,右手持另一解剖针按住幼虫头部,果断、快速、有力地向右拉,把虫体前端扯断,唾腺随之露出。唾腺呈半透明,球棒状,前端较细,后端粗钝,有时成对粘在一起成“V”字型,其外侧有时附有乳白或淡黄色的脂肪, 此时应保留唾腺形态的完整,因为食道和肠管也是半透明的,如果唾腺不完整,就很难判断唾腺和肠道的取弃。


2.把唾腺剔出移到玻片的干净处,并清除其余器官和组织。如果唾腺上附有脂肪,应把乳白色或淡黄色的脂肪清除干净,保留半透明的唾腺。


3.把多余的生理盐水用吸水纸吸干,加一滴 1mol盐酸;室温下水解2分钟,然后吸干。


4.用 蒸馏 水一滴,清洗吸干2次。吸水纸不要太靠近标本,以免标本丢失。


5.加一滴改良苯酚品红,染色3-5分钟。染色的同时,用镊子把唾腺稍捣碎。


6.用镊子取一盖玻片,以45。角徐徐落下,排净气泡,取少许吸水纸铺在盖玻片上,用左手食指和拇指固定盖玻片位置,右手拇指使劲按压。为使染色体铺展得舒张,可站起来把上半身的体重施于右拇指上,效果会更好。


蛹及三龄幼虫、

果蝇三龄幼虫

挑取果蝇唾液腺

挑出唾液腺


唾腺与肠道的区别

果蝇唾腺

加入盐酸后的唾腺

果蝇唾腺染色体

果蝇唾腺染色体模式图

实验结果】

1.先用100X镜观察片子,找到铺展较好的染色体图像后,将其移动至视野中心,再用400X镜观察。


2.黑腹果蝇的染色体数目是2n=2X=8,X=4,但是在唾腺细胞中发生体细胞染色体配对,所以染色体数目减半。X染色体和4号染色体是端部着丝粒染色体,其着丝粒在染色中心上,另一端向外伸展。2、3号染色体是中部着丝粒染色体,其着丝粒也在染色中心,各自的两臂呈“V”字型向外伸展。按道理应该观察到6个头,但因为4号染色体较短小,往往在光学显微镜下看不到,所以通常在铺展较好的情况下只能观察到5个头。雄果蝇的Y染色体异染色质部分几乎包含在染色中心,染色稍淡,而且染色体比雌果蝇的稍细。

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