T细胞功能的检测（T细胞增殖试验和T细胞介导的细胞毒试验）

互联网2013-07-08

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　　T细胞具有多种生物学功能，如直接杀伤靶细胞，辅助或抑制B细胞产生抗体，对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等，据此建立了一系列的检测方法，其中有些已用作临床检测细胞免疫功能的指标。

　　T细胞增殖试验

　　本试验又称T细胞转化试验。T细胞在体外经某种物质刺激，细胞代谢和形态相继发生变化，主要表现为短时间内细胞表面电荷即起变化，数小时后细胞内酶活化，在24～48h细胞内蛋白质和核酸合成增加，从而产生一系列增殖的变化，如细胞变大、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、染色质疏松、淋巴细胞转变成母细胞。因此，这种淋巴细胞增殖又称淋巴母细胞转化（lymphoblasttransformation）。淋巴细胞增殖反应既可通过形态学观察计数，也可用 3 H-TdR掺入法检测细胞内DNA合成量的增加，据此判断出淋巴细胞对有关刺激的反应性与功能状态。

　　体外引起淋巴细胞转化的刺激物种类很多，可分为非抗原性刺激物和抗原性刺激物两类。

　　1．非抗原性刺激物如植物血凝系（phytoagglutinin，PHA）、刀豆素A（concanavalinA，ConA）、美洲商陆（pokeweedmitogen，PWM）和脂多糖（LPS）等，通称促有丝分裂原（mitogen）。其中LPS刺激B细胞，PWM可刺激T和B两类细胞，PHA和ConA刺激T细胞增殖。

　　2．抗原性刺激物如破伤风类毒素、链球菌激酶、纯化蛋白衍生物（purifiedproteinderivative，PPD）和白色念珠菌等。同种异型组织抗原也可作为刺激物，例如HLA，用混合淋巴细胞培养法观察器官移植中受体细胞对供体细胞的反应性实质上也是一种淋巴细胞转化试验。

　　非抗原性刺激物可使正常人外周血中的淋巴细胞引起转化，与机体是否对某种抗原致敏无关，因此属非特异的淋巴细胞转化。抗原刺激物的作用只能使相应致敏的淋巴细胞发生转化，因此转化率大大低于非特异性转化。通常应用最多的刺激物是PHA，特异性抗原仅使已经相应抗原致敏的T细胞发生转化，转化率一般约5％～30％，而且需要培养4～5天。虽然T细胞对特异和非特异性抗原的识别过程不同，但被激活后，诱发的分裂和增殖过程却是相同。因此根据非特异性促有丝分裂原激活T细胞增殖反应的程度，同样可推测T细胞识别特异性抗原增殖反应。目前淋巴细胞转化试验是判断T细胞功能的一项常用的非特异性体外免疫学检测指标。