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自制细胞实验的缺氧装置

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1.培养板(如96孔等)细胞实验的缺氧装置:

[材料]:塑料泡沫盒 1 个;橡胶导管两个;玻璃胶;

[注意]:进气孔应该在里下位,出气孔应在上外位(因为通的气体密度较大);导管 与泡沫盒连接处用玻璃胶封好.

[方法]:将培养板放入盒子后,盖上盖子,用纸胶封好,然后往里通气(CO2和N2的混合气)10分,接着用止血钳把两个导管夹住密封.最后可以把整个盒子放入37度孵箱内.

2.细胞瓶内细胞实验的缺氧装置:

[材料]:医用输液器;空气过滤器(过滤空气中的细菌,杂质)

[注意点]:严格在超净台操作;进入细胞瓶内的输液器必须保持无菌;输液器与空气过滤器用纸胶封好.

[方法]:将细胞瓶直立,用无菌镊子提着输液器出气端,放入细胞瓶内,注意不要碰到贴壁细胞和培养液,然后通气5min,迅速将出气端拿出细胞瓶,盖好瓶盖.

【改进】我用直头玻璃吸管插入一次性输液管,这样容易控制方向和深度,也不会碰到瓶壁。不象以前插入细胞瓶的输液管因扭曲不容易掌握方向和深度。

丁香园网友CindyGloria的观点为:

我们实验室有人做过,我很清楚。而且我早就知道自制的缺点,果不其然,最后还是放弃了。

你的问题在于,不实用。具体是:

1、塑料泡沫盒------密闭性能怎么样?你有把它浸泡在水里看它的漏气不漏气吗?

我们用泡沫封过边,密闭性很差,还不如橡胶。用纸胶封效果也不好。 事实上,泡沫盒子的密闭性很差,即使你用胶水粘合后,密闭性还是很差。

最简单的方法就是,把泡沫盒子放到水里,一边进气一边出气,等时间长一点你就会发现有很多气泡出来。

也就是说,你通混合气10分钟后,没过多久气体就泡了。

橡胶导管--不如硅胶管,当然如果没有可以用橡胶管。

2、把整个盒子放入37度孵箱内————

你这个盒子怎么灭菌? 莫非这个培养箱只有你一个人在用?

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