技术贴:抗体药物下游工艺解决方案
GE医疗生命科学
单克隆抗体
单克隆抗体药物一直都是免疫治疗的热点,也成为医药巨头竞争的前沿阵地。
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癌症免疫疗法被各大顶级学术杂志评为最佳科学突破,被视为癌症治疗药物的第三次革命。免疫疗法靶点是正常免疫细胞,激活人体自身的免疫系统来治疗癌症。 具有代表性的肿瘤免疫治疗是以 PD1 靶点的药物。
PD-1
PD-1(Programed death-1),程序性死亡受体,位于正常免疫T细胞表面,是一种重要的免疫抑制分子,由日本京都大学本庶佑教授于 1992 年发现。2013 年同样靶点 PD1 的两个新药物,施贵宝的 nivolumab (商品名:Opdivo)和默沙东的pembrolizumab(商品名:Keytruda),发布了令人震惊的临床效果:在所有已有治疗方案都失效的黑色素癌晚期病人(多数癌症已经转移)身上,这两个药物让 60% 以上的病人肿瘤减小乃至消失了超过 2 年,标志着免疫疗法取得突破性进展。
「了解下游层析处理的关键 」
1、什么下游层析处理的关键?
2、如何选择亲和填料?
3、亲和填料耐碱为何重要?
使用盐酸胍以及0.1M NaOH处理填料的效果对比图
4、GE 亲和填料 Mabselect SuRE LX 的显著优势是?
相较于其他亲和填料,GE的Mabselect SuRe LX 是在 Mabselect SuRe 的基础上,显著提高了对抗体的结合载量(平均动态结合载量 DBC 约 60g/L),且一如继往地保持其洗脱产物的纯度和高回收率,同时它也是市面上唯一可耐受高达 0.5M NaOH 清洗且可以有较长使用寿命(150 个 Cycle 依然保留 80% 动态载量)。若在 0.1M NaOH 清洗的情况下,300 个 Cycle 保持 95% 以上的动态载量,显著的使用寿命大大降低了生产成本,同时可以耐受 0.5M NaOH 进行清洗,大大减少样品间的交叉污染几率以及提高清洗的效率。而这最新一代的耐碱,高载量的亲和填料 Mabselect SuRe LX 也已经成功的应用于抗体药物研发纯化工艺中。
(1)Adhere 多模式填料——实现两步法抗体层析工艺
Capto Adhere 介质为复合多模式填料,其配基含有阴离子交换,氢键和疏水性质,对于抗体的聚集体有非常独特而高效的去除能力,此外通过有效的实验设计(DoE),还可以起到有效去除脱落的Protein A 配基,宿主蛋白(HCP),核酸,内毒素以及潜在的病毒,且通过流穿模式时,Capto Adhere 载量可达 100-200mg/ml,将 Mabselect SuRe LX 和 Capto Adhere 相结合,仅用两步层析纯化,就可以得到符合药用级质量要求的高纯度抗体产品,大大缩短了工艺时间,提高生产效率,同时增加了收率,降低生产成本。
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全析因DoE设计模型设计Capto Adhere ImpRes纯化步骤以及DoE分析结果ss
(2)经典三步法——抗体纯化组合再添新成员
经典版的抗体三步法纯化工艺一直是抗体下游应用最多的组合,可以帮助大部分抗体客户快速的建立抗体的纯化生产工艺,加快产品的上市周期以及在激烈的竞争中分享市场快速发展带来的利益。
(3)多模式填料——抗体纯化中的应用优势
从以上抗体纯化的 Toolbox 组合中,可看到多模式填料的广泛应用,相较于传统单一的阴阳离子交换填料,多模式填料(Adhere以及MMC)在配基中添加了苯环以及氢键效应,使得这两款填料在使用中可以耐受样品较高的盐浓度(150mM)而不明显影响填料对样品的载量,同时也可以利用配基中苯环疏水性能,对抗体及其电荷异构体,聚集体和降解带等达到较好的分离效果。
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