封闭贴敷试验

器材：

30 ml 广口瓶 3 只、2 ml 注射器若干只、条状 1 cm x 1000 cm 医用胶带、块状 26 cm x 500 cm 医用胶带、标签纸、保鲜膜、吸水滤纸、纱布

试剂：

① 硫化钡

② 淀粉

③ 滑石粉

④ 1% 2,4-二硝基氟苯（DNFB）丙酮溶液

⑤ 医用生理盐水

封闭贴敷试验的基本过程可分为如下几步：

在试验开始之前彻底剪除或脱除动物试验部位被毛。将适当尺寸的敷贴片（滤纸或吸收性纱布）浸透试验材料或浸提液，局部贴敷于动物的除毛部位，再用封闭性包扎带固定 6 小时。

A 预试验是为了确定主试验中所用试验样品的浓度。预期局部使用的医疗器械和采用通用溶剂制备未经稀释的浸提液不需要进行预试验。每种试验样品局部贴敷采用 4 种浓度，使用合适的敷贴片贴敷于至少 3 只动物的两腹侧部。

B 6 小时后除去包扎带和敷贴片。除去敷贴片后 24 小时和 48 小时，按表 10-5-24 给出的 Magnusson 和 Kligman 分级标准评价试验部位皮肤红斑和水肿反应程度。应选择最高浓度在主试验的诱导阶段仅出现轻微红斑，但不对动物产生其他有害作用；或最高浓度在主试验的激发阶段不出现红斑的样品浓度进行试验。

A 诱导阶段。按选定的试验样品浓度或样品浸提液，将合适的敷贴片浸透试验样品，局部贴敷于每只动物的左上背部位。

B 6 小时后除去固定胶带、封闭包扎带和敷贴片。1 周中连续 3 天重复该步骤，同法操作 3 周。对照动物仅使用生理盐水浸透的滤纸片或者 0.5% DNFB 丙酮溶液同法操作。

A 最后一次诱导贴敷后（14 ± 1）天，用试验样品或样品浸提液对全部实验动物和对照动物进行激发。按选定的试验样品浓度，将合适的敷贴片浸透试验样品单独局部贴敷于每只动物去毛的未试部位。

B 6 小时后除去固定胶带、封闭包扎带和敷贴片。对照组动物用合适的敷贴片将载有对照液的敷贴片敷贴在对照组动物腹背部脱毛区同法操作。

A 首次激发后或再次激发接触后（24 ± 2）小时，按表 10-5-24 给出的分级标准对试验部位评分，并在除去激发敷贴片后（48 ± 2）小时再进行评分。为了将结果评价偏差降至最低限度，特别推荐在不知试验处置信息的情况下进行读数。