呼吸运动的调节
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[实验目的]
掌握描记呼吸运动的方法,观察各种因素和某些药物对呼吸运动的影响,并了解其作用的机理。
[实验原理]
呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。呼吸中枢的活动受内、外环境各种刺激的影响,可直接作用于呼吸中枢或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。其中较重要的有呼吸中枢、牵张反射和各种化学感受器的反射性调节。
[实验对象]
家兔。
[实验药品]
20%氨基甲酸乙酯溶液、3%乳酸溶液、生理盐水。
[实验 仪器 与器械]
生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪、刺激器)、呼吸换能器(或张力换能器)、刺激电极、手术台、兔用手术器械一套、气管插管、50 cm橡皮管、注射器(20 ml)、CO 2 球胆、空气球胆、钠石灰瓶、纱布、棉线等。
[实验方法与步骤]
1、麻醉、固定动物、气管插管
取家兔一只,称重,用20%氨基甲酸乙酯溶液按5 ml·(kg体重)-1耳缘静脉注射,麻醉后,仰卧位固定于手术台上,剪去颈部兔毛,沿颈部正中做3~4 cm长的切口,进行气管插管。分离颈部两侧的迷走神经,穿线备用。
2、呼吸运动的描记
切开胸骨下端剑突部位的皮肤,沿腹白线剪开约2 cm小口,打开腹腔。暴露出剑突内侧面附着的两块膈小肌,仔细分离剑突与膈小肌之间的组织,并剪断剑突软骨柄(注意止血),使剑突完全游离。此时可观察到剑突软骨完全跟随膈肌收缩而上下自由运动。用一弯钩勾住剑突软骨,弯钩另一端与张力换能器相联。由换能器将信息输入生物信号采集处理系统,以描记呼吸运动曲线。或将呼吸换能器(流量式和热敏式)安放在气管插管的侧管上,以记录呼吸运动。
3、 仪器 连接:
①
生物
信号采集处理系统 呼吸(张力)换能器与
生物
信号处理系统的CH1通道相连;刺激电极与刺激插孔相连。
②二道生理记录仪: 张力换能器的输出导线与二道仪输入插孔相连;连接刺激装置,接通电源。
4、观察项目
(1)启动“开始”按扭,描记一段正常呼吸曲线,观察正常呼吸运动与曲线的关系,并区分心搏波、呼气波、吸气波和梅耶氏波。
(2)
窒息:
夹闭气管插管套管的1/2~2/3,持续10~20秒,观察呼吸运动的变化情况。
(3) 增加吸入气中CO 2 浓度: 将充满CO 2 的球胆开口对准气管插管一侧管,松开球胆夹子,缓慢增加吸入气中CO 2 浓度,待呼吸变化明显时夹闭球胆。
(4) 缺O 2 : 将一侧气管套管夹闭,呼吸平稳后,另一侧套管通过一只钠石灰瓶与盛有空气的球胆相连,使动物呼吸球胆中的空气。经过一段时间后,球胆中的氧气明显减少,但CO 2 并不增多(钠石灰将呼出气中CO 2 吸收),此时呼吸运动有何变化?待呼吸变化明显后,恢复正常呼吸。
(5) 增大无效腔: 夹闭一侧气管套管,呼吸平稳后,另一侧套管接一段约50 cm长的橡皮管,动物通过此橡皮管呼吸,观察呼吸运动的变化,结果明显后去掉橡皮管恢复正常呼吸。
(6) 牵张反射: 将事先装有空气(约20毫升)的注射器(或用洗耳球)经橡皮管与气管套管的一侧相连,在吸气相之末堵塞另一侧管,同时立即向肺内打气,可见呼吸运动暂时停止在呼气状态。当呼吸运动出现后,开放堵塞口,待呼吸运动平稳后再于呼气相之末,堵塞另一侧管,同时立即抽取肺内气体,可见呼吸暂时停止于吸气状态,分析变化产生的机理。
(7) 迷走神经的作用:
①切断一侧迷走神经,呼吸运动有何变化?再将另一侧迷走神经结扎后在离中端剪断,呼吸运动又有何变化?
②重复第6项实验,比较呼吸变化有什么区别。
③以中等强度重复脉冲刺激迷走神经向中端,观察在刺激期间呼吸运动的变化。
(8) 增加血液中H+浓度: 经耳缘静脉快速注入3%乳酸1~2ml,观察呼吸运动的变化。
[注意事项]
1.气管插管内壁必须清理干净后才能进行插管。
2.气流不宜过急,以免直接影响呼吸运动,干扰实验结果。
3.当增大无效腔出现明显变化后,应立即打开橡皮管的夹子,以恢复正常通气。
4.经耳缘静脉注射乳酸要避免外漏引起动物燥动。
5.每一项前后均应有正常呼吸运动曲线作为比较。
[实验结果]
剪贴记录曲线,比较各种处理前后,呼吸幅度、频率的变化。对全班结果加以统计,以平均值±标准差表示,并用直方图表示。