【讨论】细胞增殖检测方法：EdU VS BrdU

直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法，其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物----BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期，和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中，再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合，就能够检测到DNA复制活跃的细胞。

但BrdU有一大缺点，就是需要变性DNA后才能与抗体结合，但这就破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。哈佛大学医学院细胞生物学家Adrian Salic就认为：“为了能够暴露BrdU的抗原表位，必须用高浓度的盐酸，乙酸或酶解，但经历了如此严重的处理后，细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。”

EdU可以检测新合成的DNA，而EU则可以检测新合成的RNA。EU是一种尿嘧啶核苷类似物，能够在RNA转录时期代替尿嘧啶( U )渗入正在合成的RNA分子，基于EU与Apollo®荧光染料的特异性反应进行RNA检测。EU能够在体内和体外水平检测时间和空间上RNA合成的变化，能够更方便地研究RNA转录位点，结合相关抗体标记能够检测与RNA有相互作用的蛋白。结合EdU和EU进行检测新合成的DNA和新合成的RNA，可以深入开展细胞增殖、细胞周期、细胞毒性、DNA复制及修复、信号通路等方面的研究。

我已经试用过EDU试剂了，做的是细胞爬片。因为流式要激发光550nm，我们实验室只有488nm。我用的是国产试剂，说明书写的一塌糊涂，最后我不得不自己完全改一个protocol.结果并不是很理想，因为我们照相机红色荧光不是很敏感，图片，没有上面的那么好。如果要我再选一次，我宁愿用PI或者是Brdu做流式。我买的试剂盒是1200元/20次。六孔板做的。

Conclusions: EdU labeling of whole lenses provides a simple, rapid and sensitive means to analyze lens epithelial cellproliferation in the anatomic context of the whole lens.

EdU标记S期细胞及检测细胞增殖是一种可靠、通用、快速、简单以及没有放射性的方法。

1) Warren等 用来检测鸡胚(组织)的细胞增殖.

2) Huang等 则通过将EdU标记脂肪来源的干细胞注入到大鼠海绵体，通过其示踪作用研究阴茎海绵体内注射脂肪来源的干细胞治疗勃起功能障碍。

3) 在临床研究方面，Kaiser等 在通过耳蜗细胞的再生来治疗听力障碍的研究中，也是用EdU标记来检测细胞增殖，并与BrdU对照，结果与BrdU同样有效，甚至更好，而且这种非抗体依赖的检测方法在应用到多种抗体检测其他细胞蛋白的过程中更是体现了它的灵活性。

4) Veres等用EdU检测T细胞的增殖来研究过敏性气管炎中树突状细胞和T细胞发生相互作用，并激活T细胞的解剖学位置。

锐博生物的EdU

贴壁细胞完全可以用EdU细胞增殖检测方法

非常感谢willion 1985提供的精彩图片及大量的文字解释，还有文献参考！

我目前在做小鼠睾丸生精细胞的增殖检测，请问能否通过组织切片利用EdU进行？你图片上的组织切片是石蜡切片还是冰冻切片或者其它呢？怎么操作的呢？能否指教一二。

红色细胞图像中箭头标识处于分裂期细胞，绿色细胞图像中箭头标识细胞增殖S期早期的增殖细胞。