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293细胞

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16498

细胞名称 293 和 293T

种属人

组织来源 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜的)蛋白的便捷方式。

形态特点 上皮细胞

致瘤性 +

产物或抗原 大T抗原

染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der(1)t(1;15)(q42;q13),der(19)t(3;19)(q12;q13),der(12)t(8;12)(q22;p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der(1)与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。

生长特性 粘附

文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5)DNA的永生化细胞。[RF32725]

表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]

早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764],现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]

此细胞系人腺病毒滴度高。

室温不贴壁,37℃几日后重新贴壁。

表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体。 [RF33793]

The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).

传代 293:培养基,含0.25% 胰酶,0.03% EDTA 消化液洗涤,弃去,加1-2ml消化液室温或37℃消化。

加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。

293T:生长快,通常倍增时间不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶过度消化。

培养基更换 每2-3天一次

冻存液 95%培养基;5% MSO

培养条件 ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠,10%加热灭活的牛血清;37℃培养

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