罗氏蛋白亲和纯化树脂：cOmplete His-Tag Purificatio

cOmplete His-Tag Purification Resin

灵活纯化蛋白、保证效能

选择靶蛋白适宜的缓冲条件

cOmplete His-Tag Purification Resin是一种新型的高效能IMAC基质，用于裂解液中His标签蛋白的一步法纯化，操作方便。采用罗氏特殊的镍螯合化学技术，该纯化树脂与常用的还原剂（如DTT ）、金属蛋白酶螯合抑制剂（如E DTA）兼容，适用于广泛底物及盐浓度的缓冲条件。

基于这种很强的组分兼容性，您可灵活地优化缓冲条件，以保持蛋白质的高度稳定性及溶解度，保护蛋白不被蛋白酶降解及避免被氧化。

使用DTT 与EDTA稳定您的蛋白

灵活使用含E DTA或DTT 的缓冲液，在不降低纯化效能的情况下，保持蛋白的高度稳定性。

获得大量高纯度蛋白质

树脂的高结合效能与结合特异性是一步法纯化蛋白的必备条件。

毒性废物排出显著降低

镍脱落量极少，大大减少了毒性废物量，并避免了镍离子重新螯合填料的麻烦。

减少镍脱落

与氨基三乙酸（NTA ）树脂或亚氨基二乙酸（IDA ）螯合树脂不同，cOmplete His-Tag Purification Resin 是通过一种特殊的化学技术，使用一种强效螯合剂将镍离子固定化获得的。

即使在E DTA与DTT 存在的条件下，镍离子的脱落量也极少，避免重新螯合填料的需要。

结果：孵育期间，cOmplete His-Tag Purification Resin镍离子脱落率小于1%。而采用不同螯合剂的两种树脂，镍离子释放至缓冲液中的量分别高达76% 与59% 。

避免频繁的柱再生操作

随心所欲地进行靶蛋白合适的缓冲条件的选择，无需担心会降低树脂的稳定性。使用含还原剂（如DTT ）与/ 或金属蛋白酶抑制剂（如E DTA）的缓冲液，不会改变cOmplete His-Tag Purification Resin的效能。得益于新型螯合剂的作用，镍离子与树脂紧密结合。

结果：即使在严苛的缓冲条件下，5 次蛋白纯化操作中，cOmplete His-Tag Purification Resin 依然可保持其稳定性，无需进行镍离子的更新螯合。

使用高效能树脂，获得高性价比

纯化柱对蛋白的结合效能主要取决于靶蛋白特性：如靶蛋白分子量、Stokes 半径、结合条件与添加组分。cOmplete His-Tag Purifcation Resin的设计是对经济性及高纯化性能的极佳平衡。在树脂中装载过量蛋白会导致蛋白质不稳定。cOmplete His-Tag Purification Resin对小分子蛋白的结合量最大。蛋白质分子越大，处理载量随之降低。

和其他任何树脂一样，cOmplete His-Tag Purification Resin 对蛋白的结合效能呈现时间依赖性。延长孵育时间可获得更高效能。

获得高度纯化蛋白

cOmplete His-Tag Purification Resin是一种基于Sepharose琼脂糖、预带电荷的、即用型N i2+- 螯合基质，用于His标签蛋白的实验室分析及大规模纯化。通过粗裂解液的一步纯化处理，即可获得高纯度目标蛋白。仅单次纯化操作即可获得理想的蛋白纯度。

结果：仅一次纯化操作，cOmplete His-Tag Purification Resin即可生成高度纯化的靶蛋白。

避免进行毒性镍溶液处理

Ni2+ 具有生物毒性，并且是一种已知致癌剂。镍对带有氧、氮与硫供体的配基具有高度亲和性，因此会影响酶及DNA的功能。镍的化学结构类似于锌，锌是多种酶的辅基，当镍占据锌结合位点时，酶功能将受到很高程度的影响。镍过量还可导致肺癌、鼻癌及骨肉瘤的发生。

在cOmplete His-Tag Purification Resin 中，由于其使用的Ni 螯合剂的独特化学特性，树脂上结合的金属离子得到保护，防止还原剂的结合。因此，该纯化柱的镍脱落率降至极低，也不需要进行频繁的再生循环（包括使用镍溶液进行重新螯合），可显著降低毒性镍溶液处理的风险，降低有毒废液的处理成本与环境危害。