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最近在做亲和素和生物素的结合的实验,用HABA染料与亲和素结合,按照文献报道亲和素和HABA形成复合物会在500nm出现吸收峰,但是我做了很多次都没有在500nm出峰。想问问有没有做这方面的,能否指点一下
loveliufudan
通常情况下,亲和素和HABA复合物的最大吸收峰在500nm左右。如果您在实验中没有观察到这样的吸收峰,可能有以下几个可能的原因:
染料的质量问题: HABA染料的质量可能会影响复合物的形成,如果染料质量不好或者使用的染料已经老化,可能会导致复合物无法正常形成。建议您检查染料的质量,或者尝试重新制备新鲜的染料。
实验条件的问题:复合物形成的情况可能受到实验条件的影响,如pH值、温度、离子强度等。如果这些条件不合适,可能会导致复合物的形成受到阻碍。建议您检查实验条件是否正确,并尝试调整实验条件。
实验过程中的误操作:有时候实验中可能存在误操作,比如样品制备不当、染料添加量不足或者过多等,可能会影响复合物的形成。建议您回顾一下实验操作过程,检查是否有误操作。
如果您已经排除了上述可能的问题,但仍然无法在500nm左右观察到复合物的吸收峰,您可以尝试使用其他方法来检测复合物的形成,比如使用荧光染料或者凝胶电泳等方法,从而验证复合物是否正常形成。
土井挞克树
1.复合物含量太低,所以500nm处没有吸收峰,建议增加复合物含量
2.复合物生成失败,考虑更换结合条件促进复合物生成