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Heymann 肾炎动物模型

相关实验:原位免疫复合物肾炎动物模型

别名:animal models of Heymann nephritis

最新修订时间:

简介

最初由 Heymann 等以 SD 大鼠肾皮质免疫兔,产生兔抗大鼠肾血清,再注射给大鼠诱导肾炎。现已明确其抗原成分来源于肾近曲小管刷状缘及肾小球上皮细胞膜,为分子量约 330 kDa 的糖蛋白(GP330),它与另一分子量约 44 kDa 的 α2-巨球蛋白受体相关蛋白结合,形成复合物。

原理

用肾脏作抗原,诱导抗肾血清,再用抗血清诱导肾炎。

用途

用于模拟膜性肾病的实验研究。

材料与仪器

实验对象:


① 成年 SD 大鼠;


② 新西兰大耳白兔。


实验器材:


① 离心机。


实验试剂:

① Tris-HCl;

② MgCl2;

③ 生理盐水;

④ 弗氏佐剂。

步骤

Heymann 肾炎动物模型的基本过程可分为如下几步:

A. 取成年 SD 大鼠肾皮质,每克肾皮质加 10 mL 的 10 mmol/L Tris-HCl(pH7.1),4 ℃ 匀浆,加入 1 mmol/L MgCl2,使其终浓度为 10 mmol/L,搅拌,1000 g 离心 10 分钟,取上清,16 000 g 离心 12 分钟,去上清,沉淀以 10 mmol/L 甘露醇或 2 mmol/L Tris-HCI 溶解,加 1 mol/L MgCl2 使其终浓度 10 mmol/L,搅拌,1500 g 离心,取上清,17 500 g 离心 12 分钟,去上清,沉淀用生理盐水洗 3 次(24 000 g,10 分钟),最后以 3 mL 盐水混悬,-70 ℃ 保存备用。

B. 取 7 mg 前述混悬液蛋白与等量弗氏佐剂混匀,给 1.5 kg 左右的新西兰大耳白兔分 4 处皮下注射,每处 0.5 mL,每周注射 1 次,连续 6 周,收集兔血清,56 ℃、30 分钟灭活补体。以正常大鼠的浓缩红细胞吸附兔抗血清中的抗大鼠血成分抗体。

C. 将经处理的免抗鼠肾血清 1~1.5 mL 给 SD 大鼠作静脉注射,1 小时后重复注射一次。

注意事项

该肾炎模型病变稳定,发病迅速,实用性强,其病理改变类似于人类膜性肾病。

来源:丁香实验

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