材料与仪器
SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶
步骤
材料与设备
SDS-PAGE 电泳装置
聚丙烯酰胺小胶(10%)
操作程序
1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后,于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。
2) 立即离心样品,留上清,供 SDS-PAGE 电泳分析,测定核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物与抗体的结合率。
注:游离的σ32 不会与免疫亲和柱结合,而上清中的核心 RNA 聚合酶复合物则可结合, 并可通过上清中核心β'β亚基(在 SDS 胶上,为~155kDa 的双带)的去除来检测。
SDS-PAGE 电泳装置
聚丙烯酰胺小胶(10%)
操作程序
1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后,于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。
2) 立即离心样品,留上清,供 SDS-PAGE 电泳分析,测定核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物与抗体的结合率。
注:游离的σ32 不会与免疫亲和柱结合,而上清中的核心 RNA 聚合酶复合物则可结合, 并可通过上清中核心β'β亚基(在 SDS 胶上,为~155kDa 的双带)的去除来检测。
来源:丁香实验