转管及转瓶培养

转管培养法（roller tube culture）是Gey 提出的，实验室常用，为了扩大细胞产量，将试管改用转瓶，故称转瓶培养，其培养方法是一样的，试管或转瓶固定在支加上，倾斜度为5°～10°左右，或将转瓶放在一排排转轴之间，使转瓶随着转轴以每小时6～12 转缓慢转动。

细胞贴附于玻璃壁四周，细胞贴壁和生长只有一个表面面积，经转动一方面使培养液流动，利于细胞吸收营养和进行代谢，一方面使细胞有机会接触气体，有利于细胞呼吸和发生氧化还原作用，有利于细胞生长繁殖。

培养瓶(管)内保持有相当大的上方空间，以维持合适的氧和pH 水平，通过转动可使细胞交替接触培养液和空气，营养可被充分利用。若需增加细胞产量，除可在增加转瓶的数量和容积外，使瓶直径尽可能小，此时表面面积可因直径或长度的倍增而成倍增加。

转瓶培养也可使用灌注培养系统，因此系统需要错综复杂回旋的可连续供应的管道进入瓶内，这是一种昂贵的选择。

［实验程序］：

本程序是在1400cm2(23×12cm)一次性塑料瓶上使用的（Corning 或Becton Dickinson）程序。

1、加入300ml生产培养液于转瓶中。

2、加入1.5×107细胞。

3、在37℃下，以12转/小时，转动2小时，使细胞均匀贴壁。

4、减少转动速度至5 转/小时并连续培养。

5、在倒置显微镜下使用长焦距物镜检查细胞。

6、在细胞生长至明显汇合时(5～6天)，移出培养液，加入0.25%胰蛋白酶，并滚动转瓶以收获细胞。洗去胰蛋白酶，加入新鲜培养基，可转入扩大再培养。为了增加表面积，有人将转瓶表面制成带皱纹的表面或插入多层隔板。以增加表面积。