欧阳小可乐
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对于需要加长时间进行转移的大蛋白而言,湿转移更适合。半干时间短,省转膜液
府宅
半干转移技术优点则体现在更快地完成转移,消耗的缓冲液少,同时,对于做实验比较挑剔的人而言,他们觉得半干转的流程也会相对干净。
在很大程度上,决定使用湿转移还是半干转移还与使用的膜的类型有关。虽然许多人认为硝化纤维(NC)膜和聚偏二氟乙烯膜(PVDF)可以在很大程度上互换,但其实两者存在一些差异。PVDF 通过疏水相互作用来结合蛋白,而硝化纤维则同时通过疏水和静电两方面相互作用来结合蛋白。因此,对于必须要求绝对最高转移水平的人来说,湿转移到 NC 膜上可能是最好的办法。但就速度和易用性而言,半干转移通常更能接近一般用途标准。
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根据常规的实验室知识,湿转移能更好地将蛋白从凝胶上转移成为印迹。如果转移过程中出现干膜会导致实验的失败,湿转移因为本身的特点,很容易就规避这样的风险,所以,对于需要加长时间进行转移的大蛋白而言,湿转移更适合。