制备单克隆抗体骨髓瘤细胞的选择

目前可用于制备McAb的骨髓瘤细胞系较多，这些细胞经药物8-AG、5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)或6-巯基鸟嘌呤(6-TG)诱导出酶缺陷型细胞系。

如缺乏次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，因为HGPRT＋ 细胞利用8-AG后，合成毒性核苷酸而死亡，只有HGPRT- 细胞能在含8-AG的培养液中生长，或缺乏胸腺嘧啶核苷激酶(TK)和次黄嘌呤-腺嘌呤磷酸核糖转移酶(HAPRT)等，这些细胞系不能通过补救途径合成DNA，只能通过主要途径合成DNA，因而对HAT敏感。

目前常用的小鼠骨髓瘤细胞系为SP2 /O和NS-1 ，X63Ag8.653等。均来自BALB/c小鼠骨髓瘤。刚复苏的瘤细胞需在含10％新鲜小牛血清的RPMI-1640培养液中，5％CO2 37℃ 孵箱培养。每2～3天换液一次，3～5天传代一次，待细胞生长稳定后方可供细胞融合用。

生长良好的细胞，在倒置显微镜下观察为圆形明亮，排列整齐、形态完整，密度适宜(0.1～1×106 个/ml)。经台盼蓝染色，活细胞数应>90％。实验室培养的骨髓瘤细胞最好每隔3～6个月将细胞在含有8-AG的培养液中培养一次，以去除回复突变的细胞。将活体内生长的骨髓瘤细胞用于融合可获得更高的成功率。体内生长的肿瘤减少了支原体污染的机会。