TetraOne™ KO：基因敲除技术的重大突破

近日，赛业生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO，一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现，是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。

基因组编辑的技术进展

传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因组编辑的三大技术及主要工具。新一代核酸酶基因编辑技术TALEN和CRISPR/Cas9作为现代分子生物学技术上的一次革新，它结合了转基因技术简便快速，没有物种限制及ES细胞基因打靶技术精准的优点，在短短的几年时间里便受到广大科研人员的青睐。

但由于其脱靶效应至今无法避免，且难以胜任大片段的基因敲入，所以还远远谈不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脱靶效应将是未来的主要研究方向。

基于同源重组的ES打靶是基因敲除的业内金标准，它通过同源重组技术将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造基因组某一基因的目的。基因打靶技术目前已被广泛认为是一种理想的特定修饰与改造生物体遗传物质的最佳方法。

尤其是条件性和诱导性基因打靶系统的建立，使得对基因在时间和空间上的靶位修饰更加明确、效果更加精确可靠。尽管如此，漫长的构建周期（需时8-12个月）却使很多研究者望而却步。

很明显，TALEN、CIRSPR/Cas9和传统ES打靶基因敲除技术有着互补的作用，而TetraOneTM KO技术却是两者优势的结合。这在目前基因组编辑的技术研究中，无疑是最为值得关注的新一代革命性技术。它使更加快速精准构建基因打靶小鼠成为可能。

TetraOneTMKO的技术原理

赛业生物科技采用独特的建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的TetraOneTM ES细胞系，通过在胚胎发育前期进行显微注射，使TetraOneTM ES细胞100%代替内源ES细胞，实现跨越“嵌合体”阶段从而一步直接获得TetraOneTM小鼠的基因打靶专利技术。实验结果显示，TetraOneTM小鼠的特征均与传统ES打靶技术产生的F1代小鼠一致。

赛业生物提供的TetraOneTMKO服务

赛业生物提供利用TetraOneTM KO技术构建的完全性基因敲除小鼠、条件性基因敲除小鼠及定点敲入小鼠的技术服务。其构建流程直接跨越了嵌合体阶段，实现6个月完成构建的极速周期：