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如何检测细菌的几丁质酶的活性

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问:如何检测几丁质酶的活性?在一篇文章里看到过,是利用这个酶来酶解底物来测量的。我的问题是:

1、在测量该酶活性时,要不要把这个酶提取出来?

2、它的底物时chitin,底物溶液怎么配制?

答:1、对几丁质酶酶活的检测一般不需要把几丁质酶提取出来,但最好能适当的浓缩一下酶溶液,因为几丁质酶的活性不是很高。

2、几丁质酶活检测的底物一般用胶状几丁质,浓度为0.5-1.0%,一般用PH5.0左右的醋酸缓冲液配制。胶状几丁质的制备方法如下:先用浓盐酸把几丁质溶解,然后用乙醇进行4度沉淀过滤,然后用玻璃纸把沉淀过滤出来,并用蒸馏水洗到中性。

答:由于我现在出差在外,查资料不太方便,但关于几丁质酶方面的文章比较多,你可以先看一下以下的文章,英文资料也比较多,你也可以上免费的NCBI搜索一下!

微生物学通报 2000年04期: 几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究;

微生物学通报 2001年04期: 微生物几丁质酶的特性、基因表达调控及应用;

上海农业学报 2001年03期: 产几丁质酶芽孢杆菌的筛选鉴定和酶活力测定。

祝好运!

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