常用培养基配方(六)
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1 三糖铁琼脂(换用方法)
成分:
蛋白胨 15g
眎胨 5g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.3g
琼脂 12g
酚红 0.025g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
2 克氏双糖铁琼脂(KI)
上层培养基成分
血消化汤(pH7.6) 500mL
琼脂 6.5g
硫代硫酸钠 0.1g
硫酸亚铁铵 0.1g
乳糖 5g
0.2%酚红溶液 5mL
下层培养基成分
血消化汤(pH7.6) 500mL
琼脂 2g
葡萄糖 1g
0.2%酚红溶液 5mL
制法:
1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解。
2 分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL。115℃高压灭菌10min。
3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固。
4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面。
3 克氏双糖铁琼脂(换用方法)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
柠檬酸铁铵 0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
琼脂 12g
酚红 0.025g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层。121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。
54 葡萄糖半固体发酵管
成分:
蛋白胨 1g
牛肉膏 0.3g
氯化钠 0.5g
1。6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL
葡萄糖 1g
琼脂 0.3g
蒸馏水 100mL
pH7.4
制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌121℃ 15 min。
55 5%乳糖发酵管
成分:
蛋白胨 0.2g
氯化钠 0.5g
乳糖 5g
2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL
蒸馏水 100mL
pH7.4
制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。
56 CAYE培养基
此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤。
57 Honda氏产毒肉汤
成分:
水解酪蛋白 20g
酵母浸膏粉 10g
氯化钠 2.5g
磷酸氢二钠 15g
葡萄糖 5g
微量元素 0.5mL
蒸馏水 1000mL
pH7.5
制法:溶解后校正pH,高压灭菌121℃ 15min,待冷至45~50℃时,加入林可霉素溶液,每毫升培养基内含90μg。
微量元素配方:硫酸镁 5g,氯化铁 0.5g,氯化钻 2g,蒸馏水 100mL
58 Elek氏培养基(毒素测定用)
成分:
胨 20g
麦芽糖 3g
乳糖 0.7g
氯化钠 5g
琼脂 15g
40%氢氧化钠溶液 1.5mL
蒸馏水 1000mL
pH7.8
制法:用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分,煮沸,并用滤纸过滤。用1mo1/L氢氧化钠校正pH。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合,分装试管10mL或20mL。121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。
59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基
成分:
甲液:胰蛋白胨 10g
蒸馏水 1000mL
乙液:磷酸氢二钠 9.5g
蒸馏水 1000mL
丙液:氯化镁(MgCl2•6H2O) 40g
蒸馏水 400mL
以上分别在121℃灭菌15min。
丁液:孔雀绿 0.2g
蒸馏水 100mL
戊液:羧苄青霉素 1mg/mL
制法:取甲液620mL,乙液160mL,丙液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL,即为1000mL培养基。分装灭菌烧瓶,每瓶100mL,或灭菌试管10mL。
60 胰蛋白胨水
成分:
胰蛋白胨 10g
蒸馏水 1000mL
pH7.0
制法:将上述成分溶解,校正pH。分装试管,121℃高压灭菌15min。
61 Rustigian氏尿素培养液
成分:
尿素 20.0g
酵母浸膏 0.1g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.091g
磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.095g
酚红 0.01g
蒸馏水 1000mL
制法:将上述成分:于蒸馏水中溶解,校正pH为6.8±0.2。 不要加热,过滤除菌,无菌分装于灭菌小试管 中,每管为约3mL。
用途:尿素酶试验用。