常用培养基配方（一）
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1、 糖发酵管
成分：
牛肉膏 5g
蛋白胨 10g
氯化钠 3g
磷酸氢二钠（Na2HPO4•12H2O） 2g
0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12ml
蒸馏水 1000ml
pH7.4
制法：
1、葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2、其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100ml，121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。将5ml糖溶液加入于100ml培养基内，以无菌操作分装小试管。
注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。迟缓反应需观察14～30d。
2、ONPG培养基
成分：
邻硝基酚β-D-半乳糖昔（O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside，ONPG） 60mg
0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.5） 10ml
1%蛋白胨水（PH7.5） 30ml
制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5ml，用橡皮塞塞紧。
试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1～3h和24h观察结果。如果β-半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。
3、西蒙氏柠檬酸盐培养基
成分：
氯化钠 5g
硫酸镁（MgSO4•7H2O） 0.2g
磷酸二氢铵 1g
磷酸氢二钾 1g
柠檬酸钠 5g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 40ml
pH6.8
制法：先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min。放成斜面。
试验方法：挑取少量琼脂培养物接种，于36±1℃培养4d，每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。
4、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）
成分：
磷酸氢二钾 5g
多胨 7g
葡萄糖 5g
蒸馏水 1000ml
pH7.0
制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1ml，121℃高压灭菌15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30ml95%乙醇中，然后加入20ml蒸馏水。
V-P试验：用琼脂培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～4d。哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养，加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5ml和40%氢氧化钾溶液0.2ml，充分振摇试管，观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
5、克氏柠檬酸盐培养基
成分：
柠檬酸钠 3g
葡萄糖 0.2g
酵母浸膏 0.5g
单盐酸半胱氨酸 0.1g
磷酸二氢钾 1g
氯化钠 5g
0.2%酚红溶液 6ml
琼脂 15g
蒸馏水 1000ml
制法：加热溶解，分装试管，121℃高压灭菌15min。放成斜面。
试验方法：用琼脂培养物接种整个斜面，在36±1℃培养7d，每天观察结果。阳性者培养基变为红色。
6、丙二酸钠培养基
成分：
酵母浸膏 1g
硫酸铵 2g
磷酸氢二钾 0.6g
磷酸二氢钾 0.4g
氯化钠 2g
丙二酸钠 3g
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml
蒸馏水 1000ml
pH6.8
制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121℃高压灭菌15min。
试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种，于36±1℃培养48h，观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。
7、葡葡糖铵培养基
成分：
氯化钠 5g
硫酸镁（MgSO4•7H2O） 0.2g
磷酸二氢铵 1g
磷酸氢二钾 1g
葡萄糖 2g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 40ml
pH6.8
制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。
试验方法：用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于36±1℃培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。
注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。
7、葡葡糖铵培养基
成分：
氯化钠 5g
硫酸镁（MgSO4•7H2O） 0.2g
磷酸二氢铵 1g
磷酸氢二钾 1g
葡萄糖 2g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 40ml
pH6.8
制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。
试验方法：用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于36±1℃培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。
注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。
8、Hugh-Leifson培养基（O/F试验用）
成分：
蛋白胨 2g
氯化钠 5g
磷酸氢二钾 0.3g
琼脂 4g
葡萄糖 10g
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml
蒸馏水 1000ml
pH7.2
制法：将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正pH至7.2。加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指示剂。混匀后，分装试管，121℃高压灭菌15min，直立凝固备用。
试验方法：从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种，同时接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面，高度约1cm，于36±1℃培养。
9、马尿酸钠培养基
成分：
马尿酸钠 1g
肉浸液 100ml
制法：将马尿酸钠溶解于肉浸液内，分装于小试管内，并于管壁画一横线。以标志管内液面高度，高压灭菌121℃20min。
试剂：三氯化铁（FeCl3•6H2O）12g，溶于2%盐酸溶液100ml中即成。
试验方法：用纯培养物接种，于42℃培养48h，观察培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时，用蒸馏水补足至原量。经离心沉淀，吸取上清液0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml，立即混合均匀，经10～15min，观察结果。
结果：出现恒久之沉淀物为阳性。
10、营养明胶
成分：
蛋白胨 5g
牛肉膏 3g
明胶 120g
蒸馏水 1000ml
pH6.8～7.0
制法：加热溶解，校正至pH7.4～7.6，分装小管，121℃高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其凝固。复查最终pH应为6.8～7.0。
试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在22～25℃培养，每天观察结果，记录液化时间。或放在36士1℃培养，每天取出，放冰箱内30min后再观察结果。
